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  • 發布時間:2022-02-17 14:25 原文鏈接: 表面等離子共振的檢測原理

      綜合運用

      表面等離子共振廣泛應用于研究結合特異性、抗體選擇、抗體質控、疾病機制、藥物發明、生物治療、生物處理、生物標記物、配體垂釣、基因調控、細胞信號傳導、親和層析、結構-功能關系、小分子間相互作用等。

      檢測原理

      表面等離子共振(SPR)是一種光學現象,可被用來實時跟蹤在天然狀態下生物分子間的相互作用。這種方法對生物分子無任何損傷,且不需任何標記物。

      先將一種生物分子(靶分子)鍵合在生物傳感器表面,再將含有另一種能與靶分子產生相互作用的生物分子(分析物)的溶液注入并流經生物傳感器表面。生物分子間的結合引起生物傳感器表面質量的增加,導致折射指數按同樣的比例增強,生物分子間反應的變化即被觀察到。這種反應用反應單位(RU)來衡量:1 RU = 1pg 蛋白/mm2 = 1 x 10-6 RIU(折射指數單位)。

      分析物在被注入的過程中,由對流和擴散流經相互作用表面而與靶分子形成復合物,導致分析物濃度改變。微射流系統內nL數量級流動通道的應用,使得這種濃度的改變降至最低點,以確保高傳質系數(Mass Transport Coefficient,km)。為保證分析物的傳質性不被限制,鍵合在生物傳感器表面的靶分子濃度必須較低。當分析物被注入時,分析物-靶分子復合物在生物傳感器表面形成,導致反應增強。而當分析物被注入完畢后,分析物-靶分子復合物解離,導致反應減弱。通過結合式相互作用模型擬合這種反應曲線,動力學常數便可被確定。而非特異性結合和總折射指數移相等效應則可通過參照曲線減除功能予以驅除。

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