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  • 實驗方法原理


    實驗材料

    實驗動物

    試劑、試劑盒

    1%戊巴比妥鈉熒光金

    儀器、耗材

    手術顯微鏡顯微手術器械

    實驗步驟


    (1)-(5)與視神經橫斷模型及熒光金逆行標記相同,不再贅述。


    (6)在眼球后極1mm處以顯微剪剪斷視神經。


    (7)取自體大鼠一側坐骨神經約1cm長,準備移植。


    (8)采用11-0帶針縫合線將坐骨神經縫合到眼球后極,然后將坐骨神經的縫合端套入視神經,使其包裹住視神經,周圍墊以明膠海綿,防止視神經從坐骨神經內滑脫。


    (9)將坐骨神經的另一端縫合到眼眶上緣。


    (10)術畢縫合眼眶以及頭皮,抗感染處理,調整頭皮張力,可容雙瞼閉合。術中及術后觀察手術側眼底供血情況。


    (11)在25d時,采用戊巴比妥鈉麻醉動物,剪開頭皮,找出縫合在眼眶上緣的坐骨神經,剪斷末端。


    (12)剪取小片封口膜并展蒲,戳一小孔,容坐骨神經通過,一小塊明膠海綿浸吸5%熒光金溶液,包埋坐骨神經以逆行標記節細胞。將封口膜折疊包裹坐骨神經及明膠海綿。


    (13)術后縫合頭皮。


    (14)3d后,注射過量戊巴比妥鈉處死動物,取眼球進行視網膜鋪片及全視網膜節細胞計數。


    3視神經夾傷模型視神經夾傷模型在近年來被一些實驗室采用,這里也一并進行介紹。


    (1)-(5)與視神經橫斷模型極熒光金逆行標記實驗相同。


    (6)在眼球后極1.5mm處以5#攝子(Dumont)夾持10s。


    (7)術畢縫合眼眶,以及頭皮,調整頭皮張力,可容雙臉閉合。術中及術后觀察手術側眼底供血情況。

    展開


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