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  • 發布時間:2018-08-20 20:10 原文鏈接: 常見血細胞分析儀的檢測原理與直方圖/散點圖

    血細胞分析儀檢驗圖形:根據檢測原理不同,分為直方圖和散射圖兩種細胞分布圖形。 


    【第一部分】血細胞直方圖(Histogram)

    希森美康/邁瑞血細胞分析儀常規檢測紅細胞/血小板的技術為電阻抗原理,又稱庫爾特原理):

    image.png

    如上圖所示,懸浮在電解質溶液中的血細胞相對于電解質溶液是非導電的顆粒,當體積不同的血細胞(或類似顆粒)通過計數小孔時,可引起小孔內外電流或電壓的變化,形成與血細胞數量相當、體積大小相應的脈沖電壓,從而間接區分出血細胞群,并分別進行計數。


    血細胞直方圖,其橫坐標為血細胞體積大小,縱坐標為不同體積細胞的相對頻率,是表示細胞群體分布情況的統計圖形。它可以顯示出某一特定細胞群的平均細胞容積、細胞分布情況及有無明顯異常細胞群的存在。

    image.png

    直方圖觀察的內容:

    ①峰的位置,反映主細胞群的位置有無異常。

    ②峰的高低,大致反映主細胞群數量的多少。

    ③峰底的寬度,反映細胞群容積大小的不均一性或離散程度大小,如RDW、PDW等。

    ④有無異常峰出現,和正常直方圖相比有異常峰出現,多提示血液中有異常細胞群或干擾因素存在。

    ⑤峰的起始處或結尾處有無異常,若有多提示有干擾因素。


    (一)紅細胞直方圖

    正常紅細胞直方圖是一條近似正態分布的單峰曲線,通常位于36~360 fl 范圍內,橫坐標表示RBC體積,縱坐標表示不同體積紅細胞出現的頻率。

    image.png

    正常紅細胞集中在50~200 fl 范圍內,可見兩個細胞群體:一個是紅細胞主群,從50~125 fl ,為一個兩側基本對稱、較狹窄,呈現倒扣鐘狀的正態分布曲線;另一群是大細胞群,位于主群右側不與X軸重合拖尾部分,分布在125 fl ~200 fl 區域,又稱“足趾部”,是一些大紅細胞、網織紅細胞、紅細胞的二聚體、多聚體及白細胞的混合物。

    異常紅細胞直方圖(圖2-11):

    image.png

    以小編的工作經驗,上圖中給出的巨幼細胞性貧血的紅細胞直方圖,曲線頂點低的太夸張了;

    下圖為小編在工作中遇到的一例明確診斷為巨幼貧的紅細胞直方圖:

    image.png

    另外,特別典型的紅細胞雙峰(明顯有兩個峰頂,如下圖),

    image.png

    還可見于缺鐵性貧血治療有效(補鐵)、巨幼細胞性貧血治療有效(補維生素B12和/或葉酸)、輸血后等。


    (二)血小板直方圖

    正常血小板直方圖是一個偏態分布的單峰光滑曲線,通常在2~30fl范圍內,主要集中在2~15fl。

    image.png

    當血標本中存在大血小板、血小板聚集、小紅細胞、紅細胞碎片時,可出現異常血小板直方圖(如圖2-12)。

    image.png


     

    【第二部分】血細胞散點圖

    希森美康/邁瑞血細胞分析儀的白細胞分群原理:

    image.png

    溶血劑使白細胞的細胞膜輕微受損,此時可利用熒光染料對各類白細胞進行染色,再運用“鞘流”“掃流”技術,使混懸在樣品中的白細胞單個成束排列通過激光檢測器,對白細胞的參數進行分析,獲取前向散射光(反映細胞大小)、側向散射光(反映細胞內部結構)和側向熒光(反映細胞內核酸/細胞器的種類與多少)三種信號,根據這三種參數區分各類白細胞。

    總之,希森美康/邁瑞五分群血細胞分析儀在測定血細胞參數的同時,還可打出直觀白細胞分類彩色的散射圖,也稱散點圖。

    散點圖觀察的內容:

    ①在分析圖形時應注意與正常圖形比較,結合細胞參數、報警提示綜合分析。

    ②注意觀察散射圖各個細胞群區域的大小、密度、顏色深淺。特別要注意除正常細胞群以外區域有無細胞群出現。


    一、白細胞散點圖

    (一)4 DIFF(四分群)通道散點圖

    利用半導體激光流式細胞術、核酸熒光染色技術,采用溶血劑完全溶解紅細胞和血小板,白細胞膜僅部分溶解。聚亞甲基藍核酸熒光染料進入白細胞內,使DNA、RNA和細胞器著色。因為熒光強度與細胞內核酸含量成比例,所以未成熟粒細胞、異常細胞熒光染色深,成熟白細胞熒光染色淺,從而得到4DIFF(四分群)白細胞散點圖(如下)。

    image.png

    最新的XN系列中,與該通道對應的是WDF通道,散點的分布基本一致,不同之處在于:

    image.png

    XN系列的溶血素試劑溶血能力更弱,在單核細胞膜上打的孔小于XE/XT系列,使單核細胞內容物復雜程度增加,同時增加傾斜度,能更好的區分淋巴細胞和單核細胞。

    邁瑞BC-6000/6000plus系列也有與之類似的通道。

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    (二)WBC/BASO通道散點圖

    在堿性溶血劑作用下,除嗜堿性粒細胞外的其他所有細胞均被溶解或萎縮,經流式細胞術計數,可得到WBC/BASO百分率和絕對值及WBC/BASO散點圖(如下)。

    最新的XN系列無此通道,而邁瑞BC-6000系列有與之類似的通道。

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