試紙片材質的好壞，對藥物穩定性和活性有很大影響。加工藥敏試紙片的試紙一般是使用加厚型的濾紙，雜質少，對藥物保存無太大影響。然而，臨床中很多用的是普通紙，被水浸潤后會呈堿性，并且含有大量無機離子，因此使用普通紙加工的試紙片藥物有較大的影響。藥敏紙片的pH值一般要求為中性，這樣才適合藥的活度。藥敏紙片的厚度要求大約1mm，這樣才有利于細菌的生長和藥物的擴散速度。藥敏紙片的直徑在6．00～6．35mm之間，紙片的厚度和直徑大小都會影響藥敏試驗的結果。
含藥紙片的片間差和質量好壞是做藥敏試驗的關鍵。一些藥敏紙片買來時就有抑菌環偏大或偏小的問題，紙片之間又存在很大的片間差。因此，紙片在用前必須檢驗其片間差和準確度，只有都達到標準要求后才能使用。同時要注意紙片的保存，因為有的紙片，如青霉素類，在保存中因為受潮濕環境的影響容易降低其藥物的活性。因此，紙片應放低溫下(-10℃)保存，同時要避免潮濕，以保持抗菌藥物的活性。盛紙片小瓶自低溫處取出應在室溫平衡至少10min后再打開，避免冷凝水影響藥效。