(1)游離水楊酸:藥典采用目視比色法檢查貝諾酯中的游離水楊酸。檢查的原理為利用貝諾酯結構中無酚羥基,不能與高鐵鹽作用,而水楊酸則可與高鐵鹽反應呈紫色,與一定量水楊酸對照溶液生成的色澤比較,從而控制游離水楊酸的限量。方法為:取本品0.1g,加乙醇5ml,加熱溶解后,加水適量,搖勻,濾入50ml比色管中,加水使成50ml,立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml,搖勻,30鐘內如顯色,與對照液(精密稱取水楊酸0.1g,置1000ml量瓶中,加水溶解后,加冰醋酸1ml,搖勻,再加水適量至刻度,搖勻,精密量取1ml,加乙醇5ml與水44ml,再加上述新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml,搖勻)比較,不得更深(0.1%)。
(2)對氨基酚:藥典采用靈敏度法檢查貝諾酯中的對氨基酚。其原理是利用對氨基酚堿性條件下能與亞硝基鐵氰化鈉生成藍色配位化合物,而貝諾酯無此反應。
取本品1.0g,加甲醇溶液(1→2)20ml,攪勻,加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1ml,搖勻,放置30分鐘,不得顯藍綠色。
(3)有關物質:貝諾酯中含有對乙氨基酚、乙撲熱息痛、阿司匹林、水楊酸等多種質。藥典采用HPLC法的自身稀釋對照法和雜質對照品法控制其限量。以十八烷烷鍵合硅膠為填充劑;以水(用磷酸調節pH至3.5)-甲醇(44:56)為流動相;檢測波長為240nm。以供試品溶液(0.4mg/ml)的稀釋液(1%)為對照液,以10μg/ml的對乙酰氨基酚為對照品溶液,規定供試品溶液的色諧圖中如有與對照品溶液主峰保留時間一致的色譜峰,其峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.1倍;其他單個雜質峰面積均不得大對照溶液主峰面積的0.5倍;各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積。