1．用牙簽從平板中挑取單菌落（直徑2～3mm），轉移到1.5ml的無菌離心管中。
2．將10μl載體DNA（100μg）與10μl轉化質粒DNA混合，振蕩均勻。（若轉化DNA是用未經RNA酶處理的“mini－prep DNA”方法制得，則不需加載體DNA）。
3．加0.5ml PLATE溶液，振蕩。
PLATE溶液：
40％聚乙二醇（PEG，分子量3350；Sigma P 3640）
0.1mol/L 醋酸鋰
10 mmol/L Tris-HCl （pH7.5）
1 mmol/L EDTA
4．置于實驗臺上，室溫培養4天。
5．置42℃下熱激15分鐘。
6．以8000～10000r/min離心10秒沉淀細胞，小心棄去上清液，將細胞輕輕懸浮到200μl無菌蒸餾水，使細胞懸浮均勻，再直接將混合液涂選擇平板。