質粒DNA的小量制備用于抽提微克級的質粒DNA，主要有堿裂解法、96孔微量滴定板堿裂解法、煮沸小量制備法。
| 實驗方法原理 | 當菌體在NaOH和 SDS溶液中裂解時，蛋白質與DNA發生變性，當加入中和液后，質粒DNA分子能夠迅速復性，呈溶解狀態，離心時留在上清中；蛋白質與染色體DNA不變性而呈絮狀，離心時可沉淀下來。這個方案可以在一天內快速制備數以百計的質粒。 |
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| 實驗材料 | 細菌克隆 |
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| 試劑、試劑盒 | TYGPN培養液異丙醇 |
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| 儀器、耗材 | 96孔微量滴定板多道加樣器多管渦旋混合器低速離心機 |
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| 實驗步驟 | 1. 在96孔微量滴定板上每孔中加人0.3 ml TYGPN培養液，每孔中接種一個含有質粒的單菌落，于37°C培養至飽和狀態（約48 h）。
2. 飽和培養液于4°C，以600 g用帶有微孔板卡槽的H-1000 B轉子離心10 min，輕輕甩去每孔中的上清液。
3. 將平板夾在多管渦旋混合器上置4擋振蕩20 s，重懸細菌。
4. 每孔先加人50 μl GTE溶液，再加人100 μl NaOH/SDS溶液，放置2 min。
5. 每孔加人50 μl 乙酸鐘溶液，蓋上蓋子或封口膜（Parafilm)。
6. 于渦旋混合器上置4擋劇烈振蕩20 s，然后于4°C，600 g離心5 min。
7. 用槍頭插人孔底的U字型的壁底，從每孔吸取200上清液至另一塊新的平板中。
8. 在新板每孔中加入150 μl異丙醇，蓋好蓋子，振動混勻，于-20°C冷凍30 min。
9. 于4°C，600 g離心25 min，棄上清。用冰冷的70%乙醇洗滌沉淀，輕輕吸去上清，再用95%乙醇洗滌，同樣輕輕吸去上清。
10. 空氣中干燥30 min后用50 μl TE重溶沉淀。于4°C短期保存，于-20°C或-70°C 長期保存。并每孔取10 μl進行分析。 |
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