8月6日上午,第31屆中國質譜學會年會的大會報告上,賽默飛世爾科技的Vlad Zabrouskov博士做了題為《Orbitrap mass spectrometry: recent developments》的報告。今年ASMS新推出的Orbitrap Elite和Q Exactive,都引起中國科學家的廣泛關注,不久前,賽默飛世爾科技在上海和北京均舉辦了新品發布會,今天的大會報告上,又帶來了一些更新的應用。
賽默飛世爾科技的Vlad Zabrouskov博士,報告題目:Orbitrap mass spectrometry: recent developments
Orbitrap Elite高場軌道阱質譜儀
Orbitarp Elite具有新型離子傳輸透鏡,改善進入Orbitrap質量分析器的離子光學傳輸。更快的雙壓線性阱;具有緊湊體積的高場Orbitrap分析+eFT,還可選配ETD。其前端的新型LTQ Velos Pro,掃描速度提高至66,000 Da/秒,每秒采集>12張譜圖;在分析復雜基質下的痕量樣品時,在注入阱時可通過injection waveform功能來累積樣品離子,防止更多的基質進入線性阱,從而更好地分離(isolation)出樣品離子。
舉例數據表明,在蛋白鑒定(Protein ID)時,Orbitrap Elite比前代產品可鑒定E.coli酶解物中更多的蛋白,并具有更高的采集速度。在Top-down蛋白質組學分析中,它可更好地表征完整蛋白質:更高的分辨率能分析更大分子量的完整蛋白質;在高分辨率下具有更快的采集速率,使Orbitrap Elite在獲得完整蛋白的MS和MS/MS時可達到在線液相分析的要求,更好地鑒定糖基化。
增強的蛋白分析能力:Improving Protein Analysis in Orbitrap Mass Spectrometry
Vlad博士隨后介紹了Q Exactive高性能臺式四極桿-軌道阱高分辨質譜儀,Q Exactive系統重新定義了定性/定量的工作流程,可分析復雜基質中的痕量代謝物、污染物和多肽。它具有新的稱之為“Quanfirmation”的功能,可在一次分析中同時完成化合物的鑒定、定量和確證分析,并具有高達140,000FWHM的分辨率。該系統的技術特點為(1)集成四極桿質量過濾器用于母離子選擇;(2)采用新型S-透鏡離子傳輸,靈敏度提高3倍;(3)先進的信號處理程序(4)快速極性切換,已完成目標和非目標化合物的篩選;(5)可在一次分析中完成3個工作流程。
Q Exactive高性能臺式四極桿-軌道阱高分辨質譜儀
相比以前的Exactive,Q Exactive的區別為:(1)前端增加四極桿分析器;(2)采用eFT信號處理系統;(3)預測的自動增益控制(pAGC),平行離子注入和檢測技術;(4)譜圖疊加功能(Spectrum Multiplexing);(5)具有更高離子傳輸率的S-lens;(6)C-trap直接和HCD碰撞池相接。
考察Q Exactive的分辨率、速度和質量準確度,在m/z 200 Da下分別設置140,000/70,000/35,000/17,500 FWHM的分辨率,每秒可采集1.5/3/7/12張譜圖。Q Exactive在外標校正下具有長期穩定的質量精度,在只有空調的房間就可以長期使用,舉例的60個小時的實驗中,室內溫度最大變化為3℃,平均變化為1℃/小時,這時考察m/z 391和m/z 445時,平均質量偏差<2 ppm。
Q Exactive具有平行離子注入C-Trap功能,最快可達12 Hz(包括pAGC和C-Trap平行注入時間)。在目標物SIM(單離子監測)實驗中,可以提高靈敏度信噪比,在化合物檢出限增加5~10倍信號強度。因此在做目標多肽定量時,可用Q Exactive的SIM功能來檢測低豐度的肽段。
Q Exactive還可進行平行注入和譜圖疊加,目標物SIM(單離子監測)實驗中,可在C-Trap中富集多個SIM離子,然后同時送入后面的Orbitrap做高分辨檢測,適用于多成分的快速檢測。譜圖疊加(MSX)功能還可擴展應用,可在1秒內同時檢測48個成分。C-Trap的離子存儲能力極強,在存貯時間內不丟失任何離子。
Q Exactive的平行分析:Multiple C-Trap or HCD Fills as a Tool for Massive Parallelization of Orbitrap Mass Spectrometry – A New Concept for Targeted Mass Analysis
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