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  • 發布時間:2019-04-08 22:28 原文鏈接: 超速離心法純化病毒實驗——界面離心分離法

    實驗方法原理離心管內病毒懸液中的病毒和細胞碎片隨其自身密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯層中
    實驗材料

    待純化的病毒

    試劑、試劑盒

    蔗糖溶液

    儀器、耗材

    離心機

    實驗步驟


    (1) 取濃縮后的病毒懸液 5 ml, 加入 1/5 或 1. 66/5 體積的 600 g/L 的蔗糖溶液,使其含蔗糖10%~15%, 搖勻。


    (2) 取一內盛 4 ml 40%~60% 的蔗糖溶液的離心管,將上述病毒懸液小心鋪加于此蔗糖溶液上面,于 20 000~40 000g( 根據病毒的大小和密度而定)離心 60~90 min血病毒在兩個界面間形成一條明顯的帶。


    (3) 小心用毛細吸管或注射針頭吸出,此時病毒懸液中大部分密度大小不同的顆粒即被分開。密度較小的浮在上層,密度較大的沉在下層。以上過程必要時可重復一次。此法所制備的病毒懸液體積較小,純度較高。


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