、轉膜后的mark非常歪的原因是膠、膜以及濾紙(三明治組合)之間氣泡沒趕干凈導致的。2、而條帶特別不清晰就得看你的轉膜時間了:轉膜時間不夠會導致膠上的蛋白包括mark沒有完全轉到膜上,轉膜時間長了會導致膠上的蛋白包括mark已經穿過膜到濾紙上了。建議電泳后膠進行考馬斯亮藍染色、轉膜后的膜進行麗春紅染色以進行逐步檢驗問題出在哪
VDF膜一定要在純甲醇里浸潤的!不然蛋白結合不上去。在100%甲醇里短暫浸潤,其目的是為了活化PVDF膜上面的正電基團,使它更容易跟帶負電的蛋白質結合。小分子及大分子量的蛋白轉移時,多加或不加甲醇也是......