5.2.3 辣椒粉
稱取辣椒粉3g（精確至0.01g）于50mL離心管中，加入8mL乙腈（3.1.1）提取，渦旋振蕩1min后，6000r/min離心5min。轉移上清液于10mL離心管中，吹干后加入2mL氫氧化鈉溶液（3.1.6），渦旋混勻30s后置于80℃水浴皂化5min。再加入2mL正己烷（3.1.3），渦旋萃取30s后，6000r/min離心5min，轉移上清液于新的10mL離心管中，加入無水硫酸鎂（3.1.2）0.5g，渦旋振蕩30s后，4000r/min離心5min，轉移上清液于10mL離心管中吹干。精密加入400μL復溶液（3.1.8），渦旋混合1min，作為待測液，立即測定。
1.1 測定步驟
5.3.1 試紙條與金標微孔測定步驟
吸取200μL待測液于金標微孔（3.4.2.1）中，抽吸5～10次使混合均勻，室溫溫育3～5min，將試紙條（3.4.2.2）吸水海綿端垂直向下插入金標微孔中，溫育5～8min，從微孔中取出試紙條，進行結果判定。
5.3.2 檢測卡與金標微孔測定步驟
吸取200μL待測液于金標微孔（3.4.2.1）中，抽吸5～10次使混合均勻，室溫溫育3～5min，將金標微孔中全部溶液滴加到檢測卡（3.4.2.2）上的加樣孔中，溫育5～8min，進行結果判定。
1.2 質控試驗
每批樣品應同時進行空白試驗和加標質控試驗。
1.2.1 空白試驗
稱取空白試樣，按照5.2和5.3步驟與樣品同法操作。
1.2.2 加標質控試驗
準確稱取空白試樣（精確至0.01g）置于具塞離心管中，加入一定體積的蘇丹紅I標準中間液（3.3.2），使蘇丹紅I添加濃度為10μg/kg，按照5.2和5.3步驟與樣品同法操作。
2 結果判定
通過對比控制線（C線）和檢測線（T線）的顏色深淺進行結果判定。目視判定示意圖見圖1。
2.1 無效
控制線（C線）不顯色，表明不正確操作或試紙條/檢測卡無效。
2.2 陰性
檢測線（T線）顏色比控制線（C線）顏色深或者檢測線（T線）顏色與控制線（C線）顏色相當，表明樣品中蘇丹紅I低于方法檢測限，判定為陰性。
2.3 陽性
檢測線（T線）不顯色或檢測線（T線）顏色比控制線（C線）顏色淺，表明樣品中蘇丹紅I的含量高于方法檢測限，判定為陽性。
2.4 質控試驗要求
空白試驗測定結果應為陰性，加標質控試驗測定結果應為陽性。
3 結論
當檢測結果為陽性時，應對結果進行確證。
4 性能指標
4.1 檢測限：辣椒醬、辣椒油、辣椒粉的檢測限為10μg/kg。
4.2 靈敏度：靈敏度應≥99%
4.3 特異性：特異性應≥85%。
4.4 假陰性率：假陰性率應≤1%。
4.5 假陽性率：假陽性率應≤15%。
注：性能指標計算方法見附錄A。
1 其他
本方法所述試劑、試劑盒信息及操作步驟是為給方法使用者提供方便，在使用本方法時不做限定。方法使用者在使用替代試劑、試劑盒或操作步驟前，須對其進行考察，應滿足本方法規定的各項性能指標。
本方法參比標準為GB/T 19681-2005《食品中蘇丹紅染料的檢測方法高效液相色譜法》。