固定液
Carnoy固定液: 純酒精60 ml 冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以選用75%酒精.
液配制
1.過碘酸酒清夜配法:
過碘酸(HIO .2H O) 0.4g 95%酒精35ml M/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml) 5ml蒸餾水10ml
保存于冰箱內,用棕色瓶,可用兩周.
2.Schiff氏液:
0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時時搖動三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃后過濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時,然后密封冰箱保存.
3.Schiff氏酒精液配置 Schiff氏液 11.5ml 1N HCI 0.5ml 純酒精 23ml
4. 亞硫酸水 1%偏重亞硫酸鈉10ml 1N HCI 10ml 蒸餾水 180ml的樹膠溶解。
5.哈瑞或邁耶蘇木精 略
染色步驟
1. 石蠟切片脫蠟至水(細胞涂片,冰凍切片直接水洗)
2. 蒸餾水洗
3. 過碘酸酒清夜10min
4. 自來水沖洗10min
5.Schiff氏液10min
6. 流水沖洗5min
7.用哈瑞蘇木精或邁耶蘇木精染核3min(細胞核染色過深可用鹽酸酒精分化)
8. 流水沖洗5min
9. 常規脫水、透明、封固
結果
PAS陽性為紅色,細胞核藍色。