實驗概要
本實驗介紹了過碘酸-雪夫（PAS）染色的原理及操作步驟。
實驗原理
胞漿內存在糖原或多糖類物質（如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的乙二醇基（CHOH-CHOH）經過碘酸（periodicacid）氧化，轉變為二醛基（CHO-CHO），與雪夫(Schiff)試劑中的無色品紅結合，形成紫紅色染料而沉積于細胞內多糖所在處。該反應稱為過碘酸-雪夫 (PAS)陽性反應，以前也稱為糖原染色。
主要試劑
1. 高碘酸氧化液：
HIO4·2H2O1g,
蒸餾水加至100ml。
此液溶解后保存于冰箱中待用。
2. Schiff試劑：
將1g堿性品紅溶于200ml煮沸的蒸餾水中。搖蕩5分鐘，冷卻至60度左右，過濾，并向濾液中入1mol/LHCl20ml，混勻。冷至 250C時，加2g偏重亞硫酸鈉（或鉀）（Na2S2O5）。將此液置帶塞的棕色玻璃瓶中，放暗處24小時。加1g活性碳，搖動1分鐘，濾紙過濾。保存于冰箱中。
3. 亞硫酸液
100g/L偏重亞硫酸鈉6ml
1mol/L鹽酸5ml
蒸餾水100ml
每次用前新鮮配置。
4. 20g/L甲綠
甲綠2g
蒸餾水加至100ml
5. 淀粉酶嚼石蠟刺激分泌唾液離心取上清液，內含淀粉酶，將麥芽糖淀粉酶0.1~1.0g溶于0.02mol/L磷酸鹽緩沖液（pH6.0）100ml中。
實驗步驟
1. 固定新鮮干燥的涂片用品5%乙醇固定10min，蒸餾水沖洗，待干；
2. 如涂片需要消化，可加唾液或麥芽糖淀酶，置室溫消化60min，然后用蒸餾水沖洗；
3. 10g/L高碘酸氧化15～20min,蒸餾水沖洗，待干；
4. 置雪夫染液中室溫染色30～60min；
5. 用亞硫酸溶液沖洗3次后，再用自來水沖洗2～3min，待干；
6. 20g/L甲綠復染10～20min；
7. 水洗，待干，鏡檢。
8. 實驗結果計算
1) 中性粒細胞糖原含量參考標準：
（-）胞質無顆粒
（ ）胞質呈淡紅色，無顆粒
（ ）胞質呈紅色，有少量顆粒
（ ）胞質呈暗紅色，顆粒較密
（ ）胞質呈紫紅色，顆粒極密
2) 淋巴細胞系：
大多數淋巴細胞呈陰性反應，少數為（ ）的陽性反應。
淋巴細胞糖原含量程度參考標準
（-）胞質內無顆粒
（ ）胞質內有顆粒
（ ）有較粗紅色顆粒
（ ）有粗大紅色顆粒
（ ）顆粒粗大并有紅色塊狀
3) 紅細胞系：
幼紅細胞和紅細胞呈陰性反應
紅細胞系列糖原含量程度參考標準
（-）胞質無顆粒
（ ）有少數紅色顆粒
（ ）有較粗紅色顆粒或彌漫紅色
（ ）有粗大紅色顆粒或深紅色
（ ）有粗大紅色塊狀或紫紅色
4) 巨核細胞：
巨核細胞和血小板染色反應均為陽性
巨核細胞糖原含量程度參考標準
（-）胞質無顆粒
（ ）少量糖原包涵體
（ ）中等量糖原包涵體，定位于核膜出或分散胞質中，占胞質1/3
（ ）大量糖原包涵體分散于胞質的1/2
（ ）糖原包涵體充滿整個胞質
5) 單核細胞呈陰性或陽性，顆粒細小，往往位于胞質邊緣：
漿細胞大多呈陰性，少數為紅色顆粒陽性；
組織細胞為陰性反應；
巨噬細胞可呈陽性，為紅色顆粒反應。
注意事項
1. 所用染色缸及器具應十分清潔、干燥；
2. 固定試劑不同，染色效果不同。目前較常用的有95%乙醇、純甲醇及甲醛蒸氣，其中乙醇固定后糖原顆粒明顯，各成熟粒細胞的反應有較明顯的顏色差異，易于判斷陽性反應的程度，且唾液消化后的對照標本沒有假陽性，故通常選用乙醇為固定劑；
3. 10g/L高碘酸溶液質量要保證，變黃則不能用，氧化時間要準確，否則將導致假陽性或假陰性；
4. 堿性品紅試劑對染色的影響不同品牌的堿性品紅染色效果不一，堿性品紅的質量是試驗成敗的關鍵因素之一。希夫(Schiff)染液應避光保存，無色，變紅則失效；
5. 染色后標本應及早觀察和記錄，染色后標本保存8天后，將逐漸褪色，保存時間延長，褪色更為明顯。