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  • 發布時間:2020-02-05 22:25 原文鏈接: 近紅外熒光檢測Westernblot介紹

    在介紹近紅外熒光凝膠成像凝膠成像檢測方法之前,我們來回顧下化學發光的歷史:WB是目前蛋白檢測的主要方法之一,1981年由尼爾·伯奈特(Neal Burnette)所著的《分析生物化學》中首次被提出,一直延續至今,仍有很多忠實的粉絲。 


    化學發光檢測的優點

    靈敏度高,其靈敏度高達fg級別。

    從零到一,化學發光的優點深入人心,經歷多年考驗仍占據一定地位。

    化學發光檢測的缺點:

    隨著科研水平的提高,簡單的化學發光已經不能滿足現在高水平的科研要求。例如:目的和內參要在同一張印跡膜上,信號和蛋白濃度要有很好的線性關系,使用總蛋白歸一化等方法,這樣傳統的化學發光就很難滿足要求。

    化學發光的信號是動態的,信號會隨著時間而發生變化。

    化學發光的信號不與目標蛋白的濃度呈線性比例關系。

    由于期刊雜志要求的升級,熒光凝膠成像WB隆重登上舞臺,特別是近紅外熒光凝膠成像檢測,成為熒光凝膠成像WB精準定量的金標準:


    近紅外WB的優點:

    精準定量——熒光凝膠成像標記的信號是靜態的,信號不會隨著時間而發生變化。信號與目標蛋白濃度呈線性比例關系。

    信號持久——印跡膜晾干避光保存,信號可持續數月,化學發光僅幾小時

    可進行多重檢測——無需剪膜、跑平行膠和剝離膜,對于共遷移條帶如磷酸化和非磷酸化檢測優勢更明顯

    節約成本——二抗可重復使用,稀釋比例高,無需化學發光檢測的膠片,顯影液,定影液和顯色底物

    要想完成近紅外熒光凝膠成像多重檢測,需要帶有近紅外光源的多功能分子成像系統。

    那市面上成像產品那么多,我們究竟該怎么進行選擇?

    最新的多功能分子成像系統——采用近紅外激光光源,激光光源更容易達到染料的吸收峰、窄光譜激光減少光泄漏的產生、在更短的時間內產生更高的信噪比,背景更低。

    多功能分子成像系統除了能完成雙激光近紅外檢測,還可完成RGB三色熒光凝膠成像檢測,高靈敏化學發光檢測,彩色圖片成像,普通凝膠檢測、植物組織和動物組織成像等。



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