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  • 發布時間:2019-04-10 17:43 原文鏈接: 還原糖含量測定——用斐林試劑熱滴定法

    實驗方法原理斐林試劑由甲、乙兩種溶液組成。甲液含有硫酸銅和次甲基藍;乙液含有氫氧化鈉、酒石酸鉀鈉和亞鐵氰化鉀。混合時,硫酸銅與氫氧化鈉起作用生成藍色氫氧化銅沉淀,而酒石酸鉀鈉在堿性溶液中使沉淀的氫氧化銅溶解而成絡合物。絡合物與還原糖共熱時,兩價銅被還原為一價氧化亞銅(紅色沉淀),再與試劑中亞鐵氰化鉀反應生成可溶性化合物而不復析出。斐林試劑中兩價銅被還原完畢后才能使次甲基藍還原為無色,故次甲基藍在此作為指示劑。
    實驗材料

    葡萄糖

    試劑、試劑盒

    硫酸銅 次甲基藍 酒石酸鉀鈉 氫氧化鈉 亞鐵氰化鉀 鹽酸 氫氧化鈉

    儀器、耗材

    滴定管 三角瓶 電子天平 電爐

    實驗步驟

    溶液配制:
    1. 斐林試劑甲液:稱取15 g硫酸銅,0.05 g次甲基藍溶于蒸餾水中并定容至1 L。 

    2. 斐林試劑乙液:50 g酒石酸鉀鈉,54 g氫氧化鈉,4 g亞鐵氰化鉀溶于蒸餾水中并定容至1L。

    3. 6 mol/L鹽酸:量取濃鹽酸500 ml加蒸餾水至1 L。

    4. 6 mol/L氫氧化鈉:稱取氫氧化鈉240 g溶于蒸餾水至1 L。

    5. 標準葡萄糖溶液(0.1%):精確稱取葡萄糖(在105 ℃干燥至恒重)1 g溶于蒸餾水中并定容至1 L。


    操作步驟:

    1.空白管測定:取斐林試劑甲、乙液各5 ml,置250 ml三角瓶中,由滴定管加適量0.1%標準葡萄糖溶液,在電爐上加熱至沸,然后以4~5 s一滴的速度繼續自滴定管中加入標準葡萄糖溶液,滴定至藍色消失,記下總共所消耗的葡萄糖體積(A)。

    2.樣品測定:6~7 ml待測樣品溶液(含糖量在3~4 mg/6~7 ml),加斐林試劑甲、乙液各5 ml,置250 ml三角燒瓶中,同空白測定一樣操作,記下所耗標準葡萄糖體積(B)。

    3.計算:

    展


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