迪馬科技：奶粉中雌激素和孕激素的檢測方法

　　 奶粉激素事件引起了社會各界的高度關注，迪馬科技作為助您保障人類食品、環境、藥品安全的實驗合作伙伴，開發出下列分析方法，能夠滿足奶粉中雌二醇、雌三醇、炔雌醇、雌酮、己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚等雌激素以及孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸氯地孕酮、甲基炔孕酮、甲羥孕酮等孕激素的檢測。希望能對您的檢測工作提供幫助。

　　1  反相SPE凈化方法

　　1.1 提取

　　稱取2.0 g奶粉(精確至0.01 g)，加入內標液(使用內標法時才需加入內標液)，加入16 ml 80%甲醇水溶液，振蕩提取2 min或超聲提取5 min。6000 rpm下離心5 min，取4 ml上清液，加入12 ml純水，混勻得到樣品稀釋液，待凈化。

　　1.2 SPE柱凈化

　　ProElut PLS親水親脂平衡柱,150 mg/6 ml

　　活化、平衡：5 ml甲醇活化，5 ml水平衡；

　　上樣：讓樣品稀釋液通過PLS小柱，流出液棄去；

　　淋洗：5 ml 5%甲醇水溶液淋洗，淋洗液棄去；

　　洗脫：5 ml純甲醇洗脫，收集洗脫液；

　　樣品重組：40 ℃下將洗脫液氮氣吹干，用1 ml 50%甲醇水溶液重新溶解殘渣，微孔濾膜過濾后供儀器分析。

　　2  正相SPE凈化方法

　　2.1 提取

　　稱取2 g奶粉(精確至0.01 g)，加入內標液(使用內標法時才需加入內標液)，加入20 ml 80%甲醇水溶液，振蕩提取2 min或超聲提取5 min。6000 rpm下離心5 min，取10 ml上清液，與50 ml純水混合得到樣品稀釋液，待凈化。

　　2.2 SPE柱凈化

　　ProElut CARB石墨化炭黑柱，500 mg/6 ml

　　ProElut NH2氨基柱，500 mg/6 ml

　　將樣品稀釋液通過經活化的ProElut CARB柱*，液體全部通過后將小柱抽干。然后將經活化的ProElut NH2柱*串接在ProElut CARB柱下方。10 ml二氯甲烷-甲醇溶液(7+3)洗脫并收集洗脫液，然后取下ProElut CARB柱，用2 ml二氯甲烷-甲醇溶液(7+3)洗脫ProElut NH2柱，合并洗脫液。然后氮氣吹干洗脫液，再用1 ml 50%甲醇水溶液溶解殘渣，微孔濾膜過濾后供儀器分析。

　　*ProElut CARB柱依次用6 ml二氯甲烷-甲醇溶液(7+3)、6 ml甲醇、6 ml水活化平衡；ProElut NH2柱活化平衡

　　3  儀器分析

　　3.1 雌激素分析條件

　　A HPLC條件：

　　色譜柱：Leapsil C18，100 x 2.1mm，2.7 μm

　　流動相：A，水；B，乙腈

　　梯度：略

　　流速：0.3 ml/min

　　柱溫：40 ℃

　　進樣體積：10 μl

　　B 質譜條件

　　電離源：ESI，負電離模式

　　電離源溫度：100 ℃

　　毛細管電壓：3 kV

　　脫溶劑氣體溫度：450 ℃

　　脫溶劑氣體流量：0.2 l/min

　　3.2 孕激素分析條件

　　A HPLC條件

　　色譜柱：Leapsil C18，100 x 2.1mm，2.7 μm

　　流動相：A，0.1%甲酸水溶液；B，甲醇

　　梯度：略

　　流速：0.3 ml/min

　　柱溫：40 ℃

　　進樣體積：10 μl

　　B 質譜條件

　　電離源：ESI，正電離模式

　　毛細管電壓：3.5 kV

　　電離源溫度：100 ℃

　　脫溶劑氣體溫度：450 ℃

　　脫溶劑氣體流量：0.2 l/min

　　關于迪馬

　　迪馬科技是一家致力于研發制造科學、高效的化學分析產品，提供完善服務和全面解決方案的知名色譜消耗品制造商，在色譜填料研發，色譜柱制造和相關分離產品等多個技術領域始終保持世界先進水平。核心技術產品包括：液相色譜柱、氣相色譜柱、固相萃取柱、色譜溶劑和化學標準品。