通道載玻片內細胞培養方法（一）

本應用簡報說明了如何在細胞培養微通道內生長貼壁細胞。將描述細胞接種，培養基交換和光學性質。另外，顯示了細胞培養通道和標準開放孔格式之間的主要差異。

為了顯示細胞接種和μ-Slide處理，使用μ-Slide VI 0.4進行演示。像通常方法一樣制備細胞懸液（例如3×105細胞/ ml）并將30μl加到通道中。將移液管尖端放在通道的入口上，并如圖所示指向通道。快速分配并填充整個渠道。

細胞附著后，如上圖所示，將60μl無細胞培養基填充到每個通道中。注意避免氣泡。如果在細胞粘附后進行填充步驟，則不會將細胞沖洗出通道。如果您想在細胞接種后立即填充通道，請小心移液。
 

μ-Slide VI 0.4在顯微鏡觀察時已充滿細胞和培養基。

填充μ-Slide VI 0.4的Luer儲液孔。

2.培養基交換

a.連續介質交換 - 推薦使用

對于連續介質更換，首先從儲存器中移除舊介質。然后，將適量的新鮮培養基加入一個儲液器中，同時從另一個儲液孔中吸出。小心使用細胞培養移液器。我們建議體積至少是通道容積的3倍。重新填充儲液器。
 
連續交換介質體積為3倍的介質。

b.完全的培養液交換 - 僅適用于昂貴的液體

如果僅僅更換通道內液體，請先清空通道。然后，將移液管尖端放在通道入口上，并小心地將液體從通道中吸出。使用細胞培養移液器徹底清除所有液體。為了重新填充通道，將通道容量的新鮮介質直接注入通道。避免產生氣泡。重新填充兩邊的蓄液孔。

完全清空通道可能導致重新填充后形成氣泡。
 

通道和儲存孔液體完全替換。

3.通道載玻片與多孔載玻片

在下面部分，我們將μ-Slide VI 0.4（細胞培養通道）的特性與μ-Slide 8孔（開放格式）進行比較。

對于接種細胞，主要差異是結構內部液體的高度。兩個系統的小區域部分如下所示。μ-Slide VI 0.4通道內部底部和頂部之間的距離為400μm。填充的μ-Slide 8孔載玻片沒有頂部結構。在8孔載玻片里面，培養基約為0.3毫，通道載玻片比開放格式8孔載玻片薄7.5倍。