細胞的免疫熒光實驗是一個基礎的細胞實驗,傳統的方法是在培養板中放入預先處理好的蓋玻片,待細胞貼壁后,使用鑷子將蓋玻片拿出再開始進行固定,染色等系列工作。
現在分享一種簡便的免疫熒光方法,無需爬片,培養-操作-鏡檢,在一個培養皿/載玻片上完成所有工作!一氣呵成!

使用如圖的培養皿和載玻片,免疫熒光步驟將簡化為:
1.直接細胞培養
2.沖洗玻片/培養皿
3.固定細胞
4.沖洗玻片/培養皿
5.染色
6.沖洗玻片/培養皿
7.凍存液處理細胞
8.直接鏡檢觀察
免去了指甲油封片的傳統免疫熒光方法中的冗長步驟:
1.無需對蓋玻片和載玻片消毒滅菌
2.無需對蓋玻片進行包被
3.無需等細胞爬片
4.無需指甲油封片
之所能如此簡便完成免疫熒光實驗,是因為這些ibidi培養皿和載玻片的底部為特殊處理的材質,絕大多數細胞可以直接貼壁生長,而不需要另外包被。同時,這些耗材的底部薄如蓋玻片,可以直接使用倒置顯微鏡進行觀察,得到高質量的成像,適用于顯微鏡比如共聚焦顯微鏡。
步驟:培養-固定-染色-鏡檢,只需在這個載玻片上進行4個步驟,免疫熒光實驗輕松完成~
優點總結:
1、節約細胞和試劑
ibidi通道載玻片里的通道只有400μm高,以μ-slide VI為例,通道的容積只有30μl,而普通8well的腔式載玻片一個孔的容積有300μl。這意味著通道需要的試劑和細胞量僅需約十分之一!對于非常珍貴的細胞和試劑來說,這可是非常重要的。