酪蛋白（Casein）的提取

一、實驗目的
1、掌握一種提取蛋白的方法。
2、掌握一種檢測牛乳質量的方法。

二、 實驗原理
酪蛋白是乳蛋白質中最豐富的一類蛋白質，約占乳蛋白的80～82%，酪蛋白不是單一的蛋白質，是一類含磷的復合蛋白質混合物，以一磷酸酯鍵與蘇氨酸及絲氨酸的羥基相結合。它還含有胱氨酸和蛋氨酸這兩種含硫氨基酸，但不含半胱氨酸。它在牛乳中的含量約為35g/L，比較穩定，利用這一性質，可以檢測牛乳中是否摻假。
酪蛋白在其等電點時由于靜電荷為零，同種電荷間的排斥作用消失，溶解度很低，利用這一性質，經牛乳調到pH4.6，酪蛋白就從牛乳中分離出來。酪蛋白不溶于乙醇，這個性質被利用來從酪蛋白粗制劑中將脂類雜質除去。

三、 儀器和試劑
儀器
溫度計、布氏漏斗、pH 試紙、抽濾瓶、電爐、燒杯、量筒、表面皿、天平等。

試劑
1. 95%乙醇、乙醚
2. pH4.6乙酸鈉緩沖液0.2mol/L
3. 乙醇、乙醚混合液：乙醇∶乙醚=1∶1(體積比)
4. 市售牛乳

四、 實驗步驟
1.酪蛋白等電點沉淀
將100mL 牛乳放到500mL 燒杯中，加熱至40℃左右的乙酸鈉緩沖液，直到pH 達4.6左右，用pH試紙或酸度計調試。將上述懸浮液冷卻至室溫，然后放置5min，用細布過濾，收集沉淀。
2.除脂類雜質
將上述沉淀用少量水洗數次，然后懸浮于30mL95%的乙醇中。將此懸浮液傾于布氏漏斗中，抽濾除去乙醇溶液，再倒入乙醇—乙醚混合液洗滌沉淀兩次，最后再用一米洗滌沉淀兩次，抽干。將沉淀從布氏漏斗中移去，在表面皿上攤開以除去乙醚，干燥后得到的是酪蛋白純品。準確稱重后，計算出每100mL 牛乳所制備出的酪蛋白數量(g%)，并與理論產量(3.5g%)相比較，求出實際獲得百分率。