1. 將過夜培養的酵母菌培養液接種到5 ml YPD培養基中，于30℃培養。離心5~10 s，用1 ml 無菌水重懸沉淀細胞，重復洗滌1次，再用1 ml 無菌水重懸。 2. 檢查細胞密度，記錄數據后將細胞密度調整到2×108細胞/ml。用無菌水系列稀釋細胞懸液，最終確定在平板上生長出100~200個菌落的稀釋度。在平板上分別涂布0.1 ml 和0.2 ml 釋的菌懸液。
3. 紫外燈在使用前要預熱≥20 min。移去培養皿的蓋直接照射。每套平板除留2個平板作對照外均進行照射，照射劑量為3×10-6J/mm2，細胞存活率為40%~70%。（沒有照射的平板充當對照以計數菌落玻殺死的比例） 4. 作為對照，將0.1 ml 未誘變的菌懸液涂布于2塊同樣的刀豆氨酸平板上，按步驟3測定的時間照射其中一塊平板，從抗刀豆氨酸的菌落計算經UV照射或未經UV照射所得到的突變頻率。 5. 在23℃培養步驟2中的平板，直到生長菌落為止，篩選溫度敏感突變株。 展開 | 