將減數分裂產物從子囊中釋放出來，通過超聲破裂，直接鋪在瓊脂平板上，孢子菌落可以通過影印平板法來篩選目的基因型。
| 實驗材料 | 酵母菌 |
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| 試劑、試劑盒 | 2-疏基乙醇乙醇酵母裂解液 |
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| 儀器、耗材 | 超聲發生器探頭離心機 |
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| 實驗步驟 | 1. 制備可供剖分四分體用的細胞。如果孢子在平板上形成，可用牙簽挑起孢子放入裝有5 ml 水的50 ml 燒瓶中；如果孢子在液體培養基中形成，可將1 ml 培養液加入5 ml 水中。然后加入0.5 ml 酵母裂解酶-20T溶液和10 μl 2-巰基乙醇，于30℃搖床緩緩搖動下培養過夜。 2. 加入5 ml 1.5%NP-40溶液，將混合懸液移到一支一次性的15 ml 試管中，冰浴15 min。 3. 超聲波處理之前要清潔超聲探頭。先用清水洗，再用乙醇沖洗，然后將超聲探頭插入裝有混合懸液的試管，并盡可能地插到液體中，但不要觸到管底或管壁。以50%~70%的滿功率超聲30 s，置冰浴中2 min，重復2次。
4. 以1 200 g 離心孢子10 min，吸去或倒去上清，再用5 ml 1.5%NP-40重懸沉淀，在旋渦混合器上劇烈振蕩，重復2次。
5. 按步驟3超聲（重復），最后一次超聲后檢查孢子。 6. 1 200 g 離心孢子10 min，吸去或倒掉上清，然后用5 ml 水重懸，在旋渦混合器上劇烈振蕩混勻，重復1次。
7. 用血細胞計數板計算10倍稀釋處理的孢子懸液，用水稀釋直到孢子濃度為103孢子/ml 每個平板涂布100 μl 孢子稀釋液，然后于30℃培養3天。
8. 影印平板，篩選目的孢子菌落。 展開 |
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