1. 注盛于一個13 mm×100 mm 無菌玻璃試管中的2 ml 培養基接種含有帶目的基因的質粒的酵母單菌落，在轉動或搖動培養箱中30℃過夜培養到靜止期。
2. 將1.5 ml 的過夜培養物轉移到微量離心管中，室溫高速離心5 s，倒掉上清，快速振蕩分散沉淀物。
3. 細胞用200 μl 破菌緩沖液重懸，加0.3 g 玻璃珠（約200 μl 體積）及200 μl 酚/氯仿/異戊醇，在漩渦混合器上高速振蕩2 min，室溫高速離心5 min。
4. 取1~2 μl 水相轉化感受態大腸桿菌只HB101或MH1，涂布在帶有合適的抗生素的LB平板上以質粒上的抗藥性標志進行選擇。
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