1. 實驗前兩天，將轉化用酵母菌株的單菌落接種于5 ml YPD培養基中，30℃過夜培養至飽和。 2. 轉化前一天晚上，在裝有500 ml YPD培養基的2 L 無菌燒瓶中接種適量的過夜培養液，于30℃劇烈搖動培養過夜，直到細胞密度達1×108細胞/ml（OD600≈1.3~1.5，依據菌株不同而異）。
3. 于4℃以4 000 g 離心收獲培養細胞，細胞用80 ml 無菌水重懸。為了增加細胞對電擊的感受性，繼續步驟4。如果這種處理并不需要的話，可接步驟6。 4. 加入10 ml 10×TE緩沖液，pH7.5。搖晃混勻，再加入10 ml 10×乙酸鋰貯液，旋轉搖勻，于30℃輕輕搖動45 min。
5. 加2.5 ml 1 mol/l DTT并同時旋轉搖動，于30℃輕輕搖動15 min。 6. 將酵母菌懸液稀釋在500 ml 水中、洗滌3次，每次以4 000~6 000 g 于4℃離心沉淀細胞，依次重懸細胞，所用的溶液如下：
（1）第一次沉淀：250 ml 冰冷的水
（2）第二次沉淀：20~30 ml 冰冷的1 mol/l 山梨醇
（3）第三次沉淀：0.5 ml 冰冷的1 mol/l 山梨醇
使用Bio-Rad公司的Gene Pusler：
9a. 往一個無菌、冰冷的1.5 ml 微量離心管加入40 μl 濃縮的酵母菌細胞和≤100 ng 待轉化的DNA（體枳≤5 μl），混勻。 10a. 將酵母與轉化DNA混合物轉移到冰冷的0.2 cm 間隙的一次性電擊池中。
11a. 以1.5 KV、25 μF、200 Ω 作脈沖轉化，電路中應包括Bio-Rad脈沖控制儀，而這十分重要，如果不這樣的話，將會損壞Gene Pulser。 12a. 往電擊池加入1 ml 冰冷的1 mol/l 山梨醇回收酵母細胞，然后用無菌的巴斯德吸管輕輕吹吸混勻。 13a. 將酵母菌液直接涂布在山梨醇選擇培養基平板上，于30℃培養3~6天，直到平板上出現菌落。 使用Life Technologies 的 Cell-Porator：
9b. 往一支無菌，冰冷的1.5 ml 微量離心管中，加入20 μl 濃縮的酵母菌和待轉化的DNA。DNA用量要≤100 ng，體積≤5 μl。 10b. 將酵母菌/DNA混合物轉移到0.15 cm 間隙的電轉槽中。
11b. 以400 V，10 μF，低電阻下進行脈沖轉化。 12b. 取10 μl 電轉混合物加到1.5 ml 無菌的微離心管中，其中含有0.5 ml 冰冷的1 mol/l 山梨醇。 13b. 將酵母菌懸液直接涂布在山梨醇選擇培養基平板上，于30℃培養3~6天，直到平板上出現菌落。 展 | 