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  • 發布時間:2019-08-02 23:11 原文鏈接: 酵母RNA的提取及含量測定(地衣酚顯色法)

    一、實驗目的  
    (1)熟悉酵母RNA的提取方法

    (2)掌握地衣酚顯色法測定酵母RNA含量的原理和方法

    二、實驗原理  
    RNA與濃鹽酸共熱時,即發生降解,形成的核糖繼而轉變成糠醛,后者與3, 5-二羥甲苯反應呈鮮綠色,該反應需用三氯化鐵和氯化銅作催化劑,反應產物在670nm處有最大吸收。RNA在20-250微克范圍內,光吸收與RNA濃度 成正比。地衣酚反應特異性較差,凡是戊糖均有此反應。RNA和其他雜質也能給出類似的顏色。

    三、試劑與器材 
    分析天平、恒溫水浴、分光光度計、沸水浴等。0.2%氫氧化鈉、乙酸、95%乙醇、乙醚、地衣酚試劑

    四、操作方法 
    ① 酵母RNA的提取

    ② RNA地衣酚法顯色測定

    ③ 數據處理及計算。

    五、關鍵步驟與注意事項

    該法反應特異性較差,凡是戊糖均有此反應。因此,測RNA含量時可先測定DNA的含量,再計算出RNA的含量


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