酶的要求：一個酶蛋白分子每分鐘可催化103～104個底物分子轉變成有色產物。用于標記的酶應符合：
1.酶的活性要強，催化反應的轉化率高，純度高。
2.易與抗體或抗原偶聯，標記后酶活性保持穩定，且不影響標記抗原與抗體的免疫反應性。
3.作用專一性強，酶活性不受樣品中其他成分的影響，受檢組織或體液中不存在與標記酶相同的內源性酶或抑制物。用于均相酶免疫測定的酶還要求當抗體與酶標抗原結合后，酶活性可出現抑制或激活。
4.酶催化底物后產生的產物易于判斷或測量，方法簡單易行、敏感和重復性好。
5.酶、輔助因子及其底物對人體無害，酶的底物易于配制、保存，酶及其底物應價廉易得。