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  • 發布時間:2020-12-03 15:28 原文鏈接: 酶標儀原理

      酶標儀即酶聯免疫檢測儀,是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器。可簡單地分為半自動和全自動2大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來分析抗原或抗體的含量。

      酶標法是什么

      酶聯免疫吸附試驗方法簡稱酶標法,是標記技術中的一種,是從熒光抗體技術,同位素免疫技術發展而來的一種敏感,特異,快速并且能自動化的現代技術。

      酶標法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯劑結合為酶標抗原或抗體,此酶標抗原或抗體可與固相載體上或組織內相應抗原或抗體發生特異反應,并牢固地結合形成仍保持活性的免疫復合物。當加入相應底物時,底物被酶催化而呈現出相應反應顏色。顏色深淺與相應抗原或抗體含量成正比。

      由于此技術是建立在抗原-抗體反應和酶的高效催化作用的基礎上,因此,具有高度的靈敏性和特異性,是一種極富生命力的免疫學試驗技術。

      酶標儀的原理

      酶標儀就是應用酶標法原理的儀器,酶標儀類似于一臺變相光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同。

      光源燈發出的光波經過濾光片或單色器變成一束單色光,進入塑料微孔極中的待測標本.該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉換成相應的電信號,電信號經前置放大,對數放大,模數轉換等信號處理后送入微處理器進行數據處理和計算,最后由顯示器和打印機顯示結果。

      微處理機還通過控制電路控制機械驅動機構X方向和Y方向的運動來移動微孔板,從而實現自動進樣檢測過程。而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測,因此省去了X,Y方向的機械驅動機構和控制電路,從而使儀器更小巧,結構也更簡單。

      微孔板是一種經事先包理專用于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內都包埋著相應的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。其常見規格有40孔板,55孔板,96孔板等多種,不同的儀器選用不同規格的孔板,對其可進行一孔一孔地檢測或一排一排地檢測。

      酶標儀測定是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。隨著檢測方式的發展,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標儀叫做多功能酶標儀,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學發光(Lum)。

      酶標儀從原理上可以分為光柵型酶標儀和濾光片型酶標儀。光柵型酶標儀可以截取光源波長范圍內的任意波長,而濾光片型酶標儀則根據選配的濾光片,只能截取特定波長進行檢測。

      酶標儀的結構

      酶標儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得,也可用分光光度計相同的單色器來得到。在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣,濾光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,其效果是相同的。光源燈發出的光經聚光鏡,光欄后到達反射鏡,經反射鏡作90°反射后垂直通過比色溶液,然后再經濾光片送到光電管。

      酶標儀可分為單通道和多通道2種類型,單通道又有自動和手動2種之分。自動型的儀器有X,Y方向的機械驅動機構,可將微孔板L的小孔一個個依次送入光束下面測試,手動型則靠手工移動微孔板來進行測量。

      在單通道酶標儀的基礎上又發展了多通道酶標儀,此類酶標儀一般都是自動化型的。它設有多個光束和多個光電檢測器,如12個通道的儀器設有12條光束或12個光,12個檢測器和12個放大器,在X方向的機械驅動裝置的作用下,樣品12個為一排被檢測。多通道酶標儀的檢測速度快,但其結構較復雜價格也較高。

      多功能酶標儀

      多功能酶標儀指擁有多種檢測模式的單體臺式酶標儀。通常具有比色皿插槽,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學發光(Lum)。可對以微孔板為體系的實驗提供多種不同模式的檢測。通常,多功能酶標儀至少可提供“吸收光”“、熒光”“、發光”三種不同的檢測模式。一些中高端多功能酶標儀還可完成“時間分辨熒光”“、熒光偏振”“、熒光共振能量轉移”等高級熒光檢測實驗。該儀器適用于臨床檢驗、微生物學、流行病學、免疫學、內分泌學以及農林科學等領域。廣泛用于醫院、血站、防疫站、生物制品等部門。


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