酶法也稱為微生物轉化法，主要是利用微生物細胞內酪氨酸酚裂解酶（tyrosine phenol-lyase，TPL，EC 4.1.99.2）將苯酚、丙酮酸和氨或者苯酚、L-絲氨酸轉化為L-酪氨酸。研究較多的、具有較高酶活的TPL主要來自于微生物草生歐文氏菌（Erwinia herbicola）、中間檸檬酸菌（Citrobacter intermedius）、弗氏檸檬酸菌（Citrobacter freundii）以及嗜熱菌（Symbiobacterium toebii）等。Genex公司的Lee和Hsiao于1986年最早利用產氣克雷伯氏菌（Klebsiellaaerogenes）絲氨酸羥甲基轉移酶和Erwinia herbicola ATCC 21434酪氨酸酚裂解酶，將以甘氨酸為底物合成L-絲氨酸的反應和以L-絲氨酸為底物合成L-酪氨酸的反應相偶聯。在500mL反應體系中加入0.32%苯酚、0.25 M 甘氨酸、0.5 mM 5-磷酸吡哆醛、0.056 M β-巰基乙醇、1.7 mM 四氫葉酸。在pH為7.0、37℃條件下以37%甲醛啟動反應，16 h后可產生L-酪氨酸26.3 g/L，甘氨酸轉化率達到61.4%。但該工藝穩定性較差而且甘氨酸對TPL活性有很強的抑制作用。考慮反應過程中酶活性和穩定性差等缺點，近年來利用DNA改組技術提高TPL穩定性也受到關注。韓國KRIBB的Eugene等人通過對Symbiobacteriumtoebii中的TPL進行隨機突變篩選和交錯延伸DNA shuffling得到了催化活性提高三倍，同時半失活溫度提高了11.2 ℃的AS6突變體。測序結果顯示在催化活性區域其存在T129I或者T451A突變，而包含A13V，E83K和T407A在內的三個突變則對提高熱穩定性有極大幫助。而此課題組的Kim等人在E. coliBL21(DE3)中過表達此催化活性和熱穩定提高的TPL，并制備成催化粗提液。在2.5 L的流加式反應器系統中通過分批補加2.2 M的苯酚、2.4 M的丙酮酸鈉、0.4 mM 5-磷酸吡哆醛和4 M的氯化銨并在反應罐上方充滿氮氣以降低底物的氧化作用，40 ℃反應30 h后可積累130 g/L的L-酪氨酸，苯酚的轉化率最高可達94%。