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  • 發布時間:2020-09-07 21:03 原文鏈接: 酶的特性實驗—底物專一性

    實驗原理

    酶的專一性是指一種酶只能對一種底物或一類底物(此類底物在結構上通常具有相同的化學鍵)起催化作用,對其他底物無催化反應。如淀粉酶只能催化淀粉水解,對蔗糖的水解并無催化作用。淀粉水解產物為葡萄糖,蔗糖水解產物為果糖及葡萄糖,這兩種己糖的半縮醛基可與 Benedict試劑反應,生成氧化亞銅的磚紅色沉淀。

    本實驗以唾液淀粉酶(內含淀粉酶及少量麥芽糖酶)和蔗糖酶對淀粉及蔗糖的催化作用,觀察酶的專一性。

    試劑和器材

    一、試劑

    2%蔗糖;1%淀粉溶液(含0.3%氯化鈉)。

    本乃狄(Benedict)試劑:溶解85g檸檬酸鈉和50gNa2CO3?2H2O于400mL蒸餾水中;另溶 8.5g CuSO4?5H2O于50mL熱水中。將硫酸銅溶液緩緩傾入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中,邊加邊攪勻,如有沉淀可過濾除去,此試劑可長期保存。

    二、材料

    (1) 唾液淀粉酶溶液:先用蒸餾水漱口,再含10mL左右蒸餾水,輕輕漱動,約2分鐘后吐出收集在燒杯中,即得清澈的唾液淀粉酶原液,根據酶活高低稀釋 50-100倍,即為唾液淀粉酶溶液。

    (2) 蔗糖酶溶液:取1g干酵母放入研缽中,加入少量石英砂和水研磨,加50mL蒸餾水,靜置片刻,過濾即得。

    三、器材

    試管1.5×15cm(×10),試管架;燒杯100mL(×1),200mL(×1);量筒 100mL(×1),10mL(×1);玻璃漏斗;竹試管夾;水浴鍋;。

    操作方法

    一、檢查試劑

    取3支試管,按下表操作:

    操作項目

    0

    1

    2

    1%淀粉溶液(mL)


    3


    2%蔗糖溶液(mL)



    3

    蒸餾水 (mL)

    3



    Benedict 試劑(mL)

    2

    2

    2

    沸 水浴煮沸2-3min




    記錄觀察結果




    二、淀粉酶的專一性

    取3 支試管,按下表操作:

    操作項目

    1

    2

    3

    唾液淀粉酶溶液(mL)

    1

    1

    1

    1%淀粉溶液(mL)

    3



    2%蔗糖溶液(mL)


    3


    蒸餾水 (mL)



    3

    搖勻置37度水浴保溫15min




    Benedict 試劑(mL)

    2

    2

    2

    沸水浴煮沸2-3min




    記錄觀察結果




      三、蔗糖酶的專一性

    取3 支試管,按下表操作:

    操作項目

    1

    2

    3

    蔗糖酶溶液 (mL)

    1

    1

    1

    1%淀粉溶液(mL)

    3



    2%蔗糖溶液(mL)


    3


    蒸餾水 (mL)



    3

    搖勻置37度水浴保溫15min




    Benedict 試劑(mL)

    2

    2

    2

    沸水浴煮沸2-3min




    記錄觀察結果





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