實驗材料 傷寒桿菌
試劑、試劑盒 鄰苯二胺碳酸鈉碳酸氫鈉PBS磷酸氫二鈉檸檬酸
儀器、耗材 聚乙烯塑料反應板離心機搖床培養箱
實驗步驟
1. 抗原包被
取潔凈的聚苯乙烯微量反應板,于每孔內加傷寒抗原0.1毫升(用包被緩沖液稀釋,蛋白含量10微克/毫升),置37℃1小時,棄抗原液,用洗滌液3次每次3分鐘。
2. 加待測血清
于每孔內分別加不同稀釋度(如1:5,1:10,1:20…1:80)的待測血清,PBS空白對照,陰性對照血清,陽性對照血清各0.1毫升。置37℃30分鐘,洗滌3次。
3. 加酶聯A蛋白
于每孔加酶聯A蛋白各0.1毫升,置37℃20分鐘,洗滌3次。
4. 加臨時配制的底物溶液各0.1毫升,置暗處15分鐘。加2M碳酸1滴終止反應。
5. 結果判斷:(肉眼判斷)
若顏色于陰性對照相同則為陰性,若較陰性對照深則為陽性,根據顏色深淺以(+)表示