酶聯免疫法檢測AFB1的理論基礎是抗原抗體反應，其采用單克隆或多克隆抗體技術，具有特異性強、分析時間短等優點。其原理是抗原（或抗體）吸附于載體上的免疫吸附劑和用酶標抗體（或抗原）與標本中的待測物（抗原或抗體）起特異的免疫學反應，最后用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度。大體分為2類：一是用雙抗體夾心法檢測樣本中的AFTB1， 二是用競爭法檢測樣本中的AFTB1,。為了使用方便，國內外已研制了酶標記免疫吸附測定試劑盒及配套儀器,方法也被列入國家標準(GB/T5009.22 1996第二法)。 [3]
但由于ELISA法中酶的活性易受反應條件影響，因此ELISA法測定結果穩定性較差，分析結果的準確性不高，容易出現假陽性結果。