該法是分析蛋白質的一種新方法，由southern blot衍化而來，后者是由Southern E.M. 所創建，即將在瓊脂糖凝膠中電泳后的DNA，原位吸附于硝酸纖維素膜上，再用放射性同位素如32P等標記的單鏈RNA或DNA探針，與板上的核酸分子雜交，從而達到分析DNA中基因位置和順序的目的。以后Alwine等采用另一種固相化的重氮芐氧甲基薄膜，以共價鍵方式和電泳后的RNA連接，從而固相化于薄膜上，再用分子探針雜交，分析RNA核酸的結構，由于此法與southern blot相對，故稱之為northern blot。接著，Towbin等又將在聚丙烯酰胺凝膠上電泳后的蛋白質按其原來的圖形，電泳轉移到硝酸纖維素膜上，再用酶標記的抗蛋白質抗體分析蛋白質電泳圖譜，現稱之為western blot，即酶聯免疫電泳轉移分析法或免疫印跡法(immunoblotting，IB)。其基本程序是先將待測蛋白質混合物標本點在板狀聚丙烯酰胺凝膠板孔上走一維或二維電泳，使樣品中的單一成分分離出來，然后取硝酸纖維素膜與電泳后的凝膠相貼，在電場方向與板面垂直的條件下，進行轉移電泳，此時，蛋白質在電場力及印跡紙的自然吸附力的共同作用下，使各個單一成分進入硝酸纖維素膜，并固相化。該膜即可用作蛋白質活性分析或免疫反應分析。硝酸纖維素膜上未吸附蛋白的活性，可用牛血清白蛋白或非離子型去垢劑滅活。然后與第一抗體溫育、洗滌，再與酶標第二抗體溫育、洗滌、酶底物顯色，進行蛋白質活性等分析。
IB法的優點是，不同的抗原成分在聚丙烯酰胺凝膠上電泳分離，然后轉移并固相化于硝酸纖維素膜上，進行抗原抗體反應時，不受其他條件的限制，加上酶標抗體的放大作用，可以鑒定微量或低效價的抗體。這樣使SDS(十二烷基硫酸鈉)聚丙烯酰胺凝膠電泳的高分辨率與ELISA的高敏感性相結合，可廣泛用于McAb等的篩選和鑒定等。
另外，將新建立的兩項與ELISA有關的檢測法簡介如下：①IgM抗體捕捉酶聯免疫吸附試驗(IgM antibody capture ELISA,MAC-ELISA)，又稱反向間接ELISA，即利用抗μ鏈特異性抗體包被固相載體，吸附待檢血清中的IgM,再加入特異性抗原與“捕捉”到的相應IgM抗體結合，然后加入酶標記抗體及底物進行測定的一種方法，該法的特異性及敏感性均較高，不受血清中IgG等的干擾，可用于各種感染性疾病的早期輔助診斷；②ELIOT測定法，用已知抗細胞因子的抗體包被固相載體，加入待檢效應細胞，溫育一定時間，洗去細胞，如細胞在溫育過程中有相應細胞因子產生，加酶標記抗體及底物溶液后則顯色，該法用于效應細胞分泌的單一細胞因子的測定。若用已知抗原包被固相載體，也可測定分泌特異抗體的B細胞頻數