[測定方法] ELISA法
[方法學原理] 在微孔板上預包被高純度基因重組HIV(1型十Ⅱ型)，與樣品中抗HIV抗體反應，同時加入HRP標記HIV(1型+Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用顯色。通過酶標儀檢測吸光度(OD值)從而判定樣品中HIV抗體的存在與否。
[標本準備] 靜脈抽血2ml，不抗凝
[試劑]
1．預包被微孔反應板條
2．酶標試劑
3．陰性對照
4．陽性對照
5．洗滌液
6．顯色劑A、B
[儀器設備] 酶標儀或全自動酶聯免疫檢測儀。
[測定步驟]
1．將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照3孔，陽性對照2孔，空白1孔。
2．每孔加人酶標試劑100~1，空白孔除外。
3．分別在相應孔中加入待測樣品或陰性對照、陽性對照20ul，振蕩混勻。37℃環境中溫育60min。
4．棄去孔內液體，用洗滌液充分洗滌6遍，最后一次盡量拍干。
5．每孔加人顯色劑A、B液各50u1，輕輕振蕩混勻，置37℃環境中避光顯色10min。
6．每孔加終止液50gl，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀波長450nm(建議用雙波長檢測)測定各孔吸光度。
7．結果判定 樣品OD值≥臨界值(cut off)者為HIV抗體初篩陽性(注意：初篩陽性標本應重新取樣品進行雙孔復試，復試陽性者應按“全國HIV檢測管理規范”送HIV確認實驗室進行確認試驗)。樣品OD值<臨界值(cutoff)者為HIV抗體陰性。
[注意事項]
1．檢測單位必須是經當地衛生行政部門批準的HIV初篩實驗室。
2．檢測必須符合HIV實驗室管理規范和生物安全守則的規定，嚴格防止交叉污染。操作時必須戴手套、穿工作服，嚴格健全地執行消毒隔離制度。所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理，終止液為2mol／L硫酸，使用時必須注意安全。
3．試劑盒從冷藏環境中取出同時應置室溫環境中平衡30min后方可使用，未用完的微孔條密封保存。
4．加液時必須用加液器，并經常校對加液器的準確性。
5．洗滌時各孔均需加滿洗滌液，防止孔內有游離酶不能洗凈。使用洗板機洗滌應設定30～60s浸泡時間。
6．HIV抗體檢測結果的判定必須以酶標儀讀數為準，建議用雙波長450／630nm檢測。
7．操作應按說明書嚴格進行，不同批次試劑不得混用。
[臨床意義] ELISA法HIVI型+Ⅱ型抗體陽性提示可能為HIV感染，但須經有關權威部門確認并須結合流行病學史和現病史診斷，同時送有國家認可資格的確認實驗室進行確認。