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  • 發布時間:2019-03-29 18:37 原文鏈接: 酸尿素連續PAGE

    實驗材料

    冷凍干燥后的蛋白樣品或塊狀蛋白樣品

    試劑、試劑盒

    丙烯酰胺二苯基碘酰氯貯存冰醋酸亞甲基藍儲存液槽緩沖液上樣緩沖液對甲苯亞磺酸鈉尿素

    儀器、耗材

    光源

    實驗步驟

    1.按以下配方制備凝膠混合物(15% 丙烯酰胺、2.5mol/L 尿素、O.9mol/L 醋酸,PH2.7)。


    2.往微型膠模具中灌制凝膠。

    3.在恒定的照明條件下光聚合 2 h。不需要做預電泳。

    4.往緩沖液槽中注滿緩沖液。

    5.溶解蛋白樣品到上樣緩沖液中,使蛋白終濃度達 35 mg/ml。

    6.將溶好的蛋白樣品加至凝膠上樣孔中。

    7.開始電泳,由正極到負極。采用廠商推薦的最佳電壓。例如,使用 Bio-RadMini-ProteannCellmini 膠時,采用 130V 電壓。

    8.待染料前沿到達凝膠底部時,關掉電源停止電泳。

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