實驗方法原理 Gomori硝酸鉛改良法是根據:以磷酸酯為底物,其被磷酸酶水解后釋放出磷酸基,在pH5左右和鉛鹽結合成磷酸鉛鹽,但磷酸鉛無色,須經硫化銨作用使其變成棕黃色至棕黑色的硫化鉛沉淀。
實驗材料 427細胞
試劑、試劑盒 丙酮乙醇Gomori硝酸鉛作用液甲基綠硫化銨
儀器、耗材 溫箱冰箱顯微鏡乳頭吸管
實驗步驟
1. 將培養的427細胞在冷丙酮或95%乙醇中固定15~30分鐘。
2. 待片干燥。
3. 移入已預熱(37℃)的作用液中孵育2小時。
4. 蒸餾水洗。
5. 移入2%醋酸酸化1分鐘,蒸餾水快速漂洗。
6. 移入1%硫化銨1分鐘,自來水漂洗數次。
7. 必要時用甲基綠復染。
8. 酸性磷酸酶活性結構呈棕黃色至棕黑色。對照:在處理過程中,在作用液中不加入甘油磷酸鈉而加入蒸餾水,則呈陰性。