既然你的質粒已經提出來了，那么感受態、轉化等因素就不必再考慮了。 你看看雙酶切后載體的位置有幾條帶，如果是兩條，那說明酶切不完全，如果是一條，那說明酶切效率沒問題。 pET28a分子量為5.6k，你的插入片段為500bp，如果你的質粒完全切開，載體和插入片段的摩爾比為1：1，質量比就是5.6k：0.5k，跑膠后兩條帶的亮度比就是10:1，所以你目的條帶很淡非常正常。 換句話說，你的實驗一切正常，那條500bp的條帶可能本來就應該那么淡。
