重組質粒的構建設計

基因工程

基因工程又稱遺傳工程、DNA 重組技術、分子克隆等。它是七十年代在分子生物學發展的基礎上形成的新學科。所謂基因工程，就是在分子水平上，用人工方法提取（或合成）某一生物的遺傳物質，在體外切割，拼接和重新組合，然后通過載體把重組的DNA 分子引入受體細胞，使外源DNA 在受體細胞中進行復制和表達。

按人們的意愿定向創造生物新性狀，使之穩定地遺傳給下一代。所以基因工程具有廣闊的應用前景，即能為工農業生產和工醫藥保健等開拓新途徑，又能為生物的細胞分化，生長發育，腫瘤發生等基礎研究提供有效的實驗手段。

近十余年來，基因工程的發展和應用，迅速地推動了生物科學的發展，目前，基因工程技術已成為生物學領域許多實驗室的常用技術，它的先進性和普及性使人們感到有必要在大學的教學課程中得到反映。所以，我系已為十幾屆本科生、研究生開設了基因工程技術實驗，選擇一些最基本，最常用的技術，以使同學對基因工程有一個基本的了解，并能掌握一些基本技術。

但是基因工程的實際技術和實驗系統正在不斷的創新，新方法、新技術不斷推出，而且在有限的學時內，所能觸及的技術只是基因工程中極少的一部分，但從教學角度來看，是不可能面面俱到。我們只是希望通過本實驗，讓同學通過基因工程中最基本的技術訓練，為今后獨立工作打下基礎。

本實驗設計主要參考書為T?Maniatis 的《Molecuiar clong》第三版，彭秀玲等編著的《基因工程實驗技術》等。實驗中所選擇的方法和條件以適合于本實驗室設備為首選，具體參考應用時，可作適當更改。

本套實驗設計過程如下：

1. 染色體DNA的抽提

2. PCR 擴增分離目的DNA 片段

3. 載體粒的抽提、純化及檢測

4. 載體及目的DNA 片段的限制性核酸內切酶酶切與連接

5. 重組粒轉化大腸桿菌

6．重組子的篩選、重組質粒的抽提與鑒定