1．原理
金免疫層析試驗（dot immunogold chromatographic
assay，DICA）是用膠體金標記技術和蛋白質層析技術結合的以微孔濾膜為載體的快速的固相膜免疫分析技術。本項技是將各種反應試劑分點固定在試紙條上，檢測標本加在試紙條的一端，通過毛細血管作用使樣品溶液在層析材料上泳動，樣本中的待測物與層析材料中的反應試劑發生特異性結合反應，形成的復合物被富集或固定在層析條上的特定區域（檢測線），通過標記免疫技術顯色。本項技術的特點是可進行單份標本檢測且簡便、快速、不需任何儀器設備，因此，發展非常迅速。
2.方法學類型
DICA多用于檢測抗原，但亦可用于檢測抗體。常見方法學類型有：
1)雙抗體夾心法測抗原：
若圖-2所示，G處為金標抗體(免疫金)，T處包被抗體，C處包被抗金標抗體，B處為吸水紙。測試時A端滴加待測標本，通過層析作用，待測標本向B端移動，流經G處時將金標抗體復溶，若待測標本中含待測抗原，即形成金標抗體-抗原復合物，移至T區時，形成金標抗體-抗原-抗體復合物，金標抗體被固定下來，在T區顯示紅色線條，呈陽性反應，多余的金標記抗體移至C區被抗金標抗體捕獲，呈現紅色質控線條。
圖-2免疫層析試驗雙抗體夾心法測大分子抗原
2）競爭法測小分子抗原：
若圖1-3所示,G處為金標抗體，T處包被標準抗原，C處包被抗免疫金抗體，測試時待測標本加于A端，若待測標本中含有待測抗原，流經G處時結合金標抗體，當混合物移至T處時，因無足夠游離的金標抗體與膜上標準抗原結合，T處無棕紅色線條出現，實驗結果為陽性，游離金標抗體或金標抗體復合物流經C處，與該處的抗金標抗體結合出現棕紅色的質控帶，若標本中不含待測抗原，金標抗體則與T處膜上的標準抗原結合，在T處出現棕紅色的線條，實驗結果為陰性。
圖-3免疫層析試驗競爭法測小分子抗原原理圖
3）間接法測抗體：
為了消除待測血清標本中大量的非特異性IgG與特異性IgG競爭結合金標記抗人IgG，降低了試驗敏感性，膠體金間接免疫層析法測抗體常設計成反流免疫層析法(圖-4)。
圖-4免疫層析試驗測抗體原理圖
測試卡分成可左右折疊的兩部分，右面中央縱向貼有NC膜條為膜上包被有抗原線T，E處為與蛋白結合的有色染料，F處吸水材料；左面中央開有觀察窗口
B，C處固定有金標記羊抗人抗體，A、D處為吸水材料。測定時先將緩沖液加在D處層析至C處使金標物復溶，然后將標本加在E處使其與染料一起在膜的層析作用下向F端移動，若標本中有待測抗體存在，則與膜上抗原結合形成抗原抗體復合物，待有色染料延伸至膜上標記線G處時，在F處加緩沖液，合上測試卡，A的強大吸水作用使膜上液體反向流動，標本中非特異性IgG及無關物被洗回E處，隨后而來的金標羊抗人抗體與抗原抗體復合物結合，出現棕紅色線條。無棕紅色線條出現則表明血清中無特異性抗體。該法有效地排除了非特異性抗體對測試的干擾。
3．實驗材料
臨床上有現成試劑盒供應，試劑盒主要成分為膠體金層析條，所用試劑全部為干試劑，它們被組合在一試劑條上(如圖15-2)，試劑條的底板為單面膠塑料片,
層析條為多孔聚乙烯、硝酸纖維素、玻璃纖維素材料，A、B兩端粘貼吸水性強的濾紙等材料。G為干燥固定在玻璃纖維膜等材料上的膠體金結合物。T為粘附有已知的抗體或抗原，C處粘附有質控品(抗免疫金抗體)，T、C點物質往往以直線的形式包被在膜上。
4．技術要點
實驗操作非常簡單 其操作要點為：
1）將試劑條標記線一端浸入待測標本中2-5秒或在標本加樣處加一定量待檢標本，平放于水平桌面上。
2）5-20分鐘內觀察結果。
3）結果判斷：陰性：出現一條棕紅線質控條帶，陽性：出現兩條棕紅線條帶，試劑失效：無棕紅線條帶出現。