金屬硫蛋白的測定實驗

牛血紅蛋白

氯化鎘 Tris-HCl 蔗糖

分光光度計 離心機

一、實驗步驟

1.  組織按1:4（w/v）加入0.25 mol/l 蔗糖溶液，制備勻漿，18 000 g離心20 min（4℃）。

2.  取上清液0.5 ml，加入1.9 ml 0.03 mol/l Tris-HCl緩沖液（pH8.0）。

3.  再加入1 ml CdCl2（10ppm）混勻，室溫孵育5 min。

4.  加入2%牛血紅蛋白0.2 ml，沸水浴1 min，室溫離心1 000 g，5 min。

5.  反復加入牛血紅蛋白，加熱、離心3次。

6.  在原子吸收分光光度計，用石墨法測定上清液Cd含量。

7.  組織MT含量按6 g原子Cd結合可分子MT計算。

8.  按Bradford 法測定上清液中的蛋白質含量。