王澎 洛陽市第一中醫院檢驗科
記得在免疫室實習的一天,我剛開始是跟著老師做快速傳染病四項(乙肝、丙肝、艾滋、梅毒),看著老師給我做了一遍,看似簡單的操作,心里想著:這不就是免疫金標法嗎?不就是滴幾滴試劑然后看結果的事嘛?
接著來了一批標本,在簽收過后,分好標本拿到老師面前,老師問我:“怎么樣?會了嗎?”我滿懷自信地點了點頭,接著她就在一邊看著,我跟著她之前的操作做了一遍,但是,在做到HCV抗體的時候我停留了一下,本來要先加血清再加稀釋液,我就突發奇想,我就反過來試試看,滴加完之后,我生怕它質控線會出不來,看著液體慢慢濕潤到質控線,“咦,老師,反過來加結果一樣做得出來”我高興地說。
老師微微一笑“你再等多五分鐘看看”。我就想:就算再等多十分鐘不也一樣嗎。我對老師點了點頭,五分鐘過后,我過來看了看結果,咦!陽性的。老師走過來說:“你再把這個標本重做一遍,但是要先加血清,再加稀釋液。”
這次我按照老師說的做,結果做出來居然是陰性!我嚇了一跳,不過是把同樣的東西順序加反了,結果卻天壤之別。
這時我的臉瞬間紅了起來,老師對我說:“一步做錯,就要苦了患者。你要記住,檢驗這個事就是不允許出現錯誤,要嚴格要求自己一定要按照規范的操作來進行,慢慢的你就會體驗到!”
這是小編第一次接觸到這個快速便捷的“小東西”,雖然操作簡單,但是一個看似簡單的操作順序一旦搞錯就會釀成參天大禍,那么“金標法”到底是一種什么樣的方法呢?
金標法,又稱免疫金標記技術。
氯金酸在還原劑的作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,形成帶負電的疏水膠溶液,由于靜電作用而成為穩定的膠體狀態,故稱為膠體金。免疫金標技術類似于酶免疫技術,它是用膠體金標記單克隆抗體,作為某些激素如LH的定性或半定量測量。
金標法又分為:層析法和斑點滲透法。
層析法一般采用雙抗原夾心法免疫測定原理,選擇經純化的基因工程制備的抗原,分別作為包被抗原和膠體金結合抗原。當待檢標本中含有HIV抗體時,先和金標記抗原結合,由于層析作用反應復合物沿硝酸纖維膜向前移動,當遇到包被抗原時,形成Ag-Ab-Ag-Au復合物富集在包被線上,形成紅色沉淀線。在包被膜上還有一條質控線對照,故當有兩條紅線時判為陽性,只有一條紅線時,判為陰性。
近年來發展的金標法檢測HBsAg,與傳統的酶免疫法(EIA)相比,具有簡便、快速、準確,不需要儀器設備等優點,能滿足臨床急診快速出結果的需要,且較適合使用于流行病學調查,應用前景非常寬廣。
但是由于試劑和方法學的限制,某些時候,金標法所做出來的結果并不可靠,現在已經被許多大醫院所淘汰,即使做,也是做一個初步篩查,不會再出診斷報告,需要酶免或者核酸定量檢查才能作出準確的判斷。
1、那么用金標法所做的術前四檢還有意義嗎?
小編認為術前四檢是非常有必要的,因為這是必要的病原學檢查,一是為了給醫生保駕護航,二更是為了妥善地制定治療方案來造福病患。
據統計資料表明,我國人群中乙肝的感染率達10%~12%,丙肝(HCV)感染率也很高。最近幾年,包括梅毒、艾滋病在內的性病也進入一個快速增長期。
這些病毒性疾病的感染途徑多種多樣,如艾滋病除通過性傳播外,還有母嬰傳播、血液傳播。據北京市獻血辦的一位專家介紹,在這三種傳播途徑中,血液傳播是感染HIV最直接的途徑,如輸入被病毒污染的血液,尤其是“窗口期”的血液(即獻血者已被病毒感染,但還未出現抗體的階段所獻血液,不能被現有的檢測手段查出);使用了被污染而又未經嚴格消毒的醫療器械,包括注射器、針灸針、口腔科器械、婦產科的接生用具以及外科手術用的刀子、剪子、鉗子等。另外,在作胃鏡、腸鏡、膀胱鏡等介入檢查和治療時,都有感染艾滋病病毒及其他病毒的可能性。
2、可是金標法雖然快速靈敏,但是結果的準確性有待商榷,臨床大夫如果急著要結果,我們碰到了陽性結果是報還是不報?
如果真的碰到了這種情況,我們應該慎重,不能因為受到了臨床的催促,就倉促地發結果,應當換另一家廠商的試劑復查,如果兩種試劑所做出的結果不一樣,那就更不能發,需要進一步做酶免法或分子生物學實驗來確定,這種時候還應該通知臨床大夫,如果不是很急的手術,最好可以將手術延期舉行,等待準確的結果,如果是性命憂天的急診手術,那就告知臨床結果不能確定,讓臨床大夫按照陽性結果來做好預防措施,這個時候,我們就要當好為大夫保駕護航的明燈。
我們身為檢驗工作者,我們的工作平凡但是并不簡單,在工作中會遇到很多問題,也會犯很多錯誤,面對金標法這種快速檢查,確實,它非常的簡單,但是它所造成的責任之重大是不可估量的,所以我們面對自己所做出來的結果應該更加謹慎,我們雖然面對的是標本,但是我們背負的是臨床大夫的信任和患者的健康,所以把簡單的事情做好,你就不簡單了!希望可以和檢驗界各位同仁一起共勉。