醫療方面
①用于治療和預防維生素B12缺乏癥。
②用于胃切除或吸收不良綜合癥，維生素B12缺乏造成貧血的預防。
③用于補充因消耗性疾病，甲狀腺機能亢進，妊娠，哺乳等造成的維生素B12需求增加。
④營養性和妊娠性貧血。
⑤廣節裂頭絳蟲病貧血。
⑥肝障礙貧血。
⑦放射性引起的白細胞減少。
⑧神經疼，肌肉疼，關節疼。
⑨末梢神經炎，末梢神經麻痹。
⑩脊髓炎，脊髓變性。
飼料添加劑
維生素B12對于機體生長是一種不可缺少的微量營養物質，大多數動物的植物性飼料中不含維生素B12，動物一方面靠胃腸中的微生物合成，一方面靠外界添加。為了滿足動物維生素的需要就必須補充維生素添加劑。
豬和雞等非反芻動物缺乏維生素B12主要表現是生長發育停滯，也有少數豬可出現輕度的正常紅細胞性貧血。此外，還可使雞的孵化率和豬的生殖率降低。缺乏癥的臨床癥狀包括食欲不振、生長停滯、單純貧血，嚴重的也有神經癥狀。
飼料維生素B12能促進家禽，特別是幼禽幼畜的生長發育。
可用于：
①維生素B12缺乏所引起的豬、雞生長發育不良和貧血；
②缺鈷地區牛、羊所出現的地方性消瘦病；
③神經炎、神經痛等的非特異性治療；
④提高飼料蛋白的利用率；
⑤經濟動物的飼養；
⑥用B12溶液處理魚卵或魚苗，可提高魚對水中有毒物質如苯和重金屬的耐受力。
其它
①食品添加劑
②可作為食品著色劑：如火腿，香腸，冰淇淋，魚肉醬。
③用于化妝品，肥皂，牙膏等，也可用于廁所，冰箱，口腔等防臭，消除硫化物和醛的氣味。
空氣污染物去毒
英國曼徹斯特大學的科學家們一項長達15年的研究取得重大突破成果，他們希望這一結果將促進研發對危險空氣污染物，例如多氯聯苯（PCBs）和二氧（雜）芑進行去毒的有效方法。這項發表在期刊《自然》上的研究細節描述了某些生物體是如何降低污染物的毒素。
曼徹斯特大學生物技術研究所的研究小組調查了某些自然生物體是如何降低毒素水平并縮短嚴重污染物的壽命。
大衛·里斯教授解釋稱：“我們已經知道某些最毒的污染物包含鹵原子，而大多數生物系統并不知道如何處理這些分子。然而，某些生物體可以利用維生素B12移除這些鹵原子。我們的研究已經能夠確定它們利用維生素的方式與我們所知的大不相同。”