陰離子位點顯示實驗——聚乙烯亞胺染色法

組織樣品

聚乙烯亞胺二甲胂酸鈉緩沖液戊二醛鋨酸

1. 用 0.1 mol/L 二甲胂酸鈉緩沖液配 1％ 聚乙烯亞胺，含 2％ 蔗糖。

2. 組織切成小塊，浸泡在聚乙烯亞胺溶液中，室溫下反應 30 min。

3. 0.1 mol/L 二甲胂酸鈉緩沖液充分漂洗。

4. 3％ 戊二醛固定，漂洗。

5. 1％ 鋨酸后固定，包埋，超薄切片，染色同常規。

1. 一般情況下，細胞或組織先與陽離子化鐵蛋白或聚乙烯亞胺反應，然后固定，這樣較易取得陽性結果。也有人先進行固定，再進行反應，這樣細胞結構保存較好，不過固定的條件需摸索好，否則不易取得陽性結果。另外，用陽離子化鐵蛋白染色時，陽離子化鐵蛋白的濃度、染色時間等，不同的細胞并不完全相同，要取得較好的結果，也需要摸索。

2. 用聚乙烯亞胺染血管內皮細胞基膜（如腎小球內皮細胞基膜）陰離子位點時，有人在動物實驗時，從血管注射給予聚乙烯亞胺，30 min 后取材，進行常規固定處理，效果較好。不過聚乙烯亞胺有毒性，對內皮細胞損傷嚴重，注射過多會導致動物死亡，一般大鼠可注射 1％ 聚乙烯亞胺 0.2 ml。

3. 心肌細胞用聚乙烯亞胺顯示陰離子位點時，有人注意到心肌細胞膜及心肌細胞膜外的基膜上都可有陰離子位點存在，但二者的分布情況不同。另外并非所有的細胞膜或基膜都可用聚乙烯亞胺顯示陰離子位點存在。