照高效液相色譜法(通則0512)測定。
避光操作。供試品溶液取本品60粒(0.25μg規格)或40粒(0.5g規格),精密稱定,傾出內容物,囊殼用乙醚洗凈。揮凈乙醚精密稱定,求出每粒內容物的平均重量。
將內容物混勻,精密稱取適量,加流動相溶解并定量稀釋制成每1m中約含阿法骨化醇1μg的溶液。對照品溶液取阿法骨化醇對照品適量,精密稱定,加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1μg的溶液。系統適用性溶液取對照品溶液適量,在日光或鎢燈光下照射0.5小時,產生一定量反式阿法骨化醇。色譜條件用硅膠為填充劑;以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯四氫呋喃(2:1:1)為流動相;檢測波長為265nm;進樣體積20p1系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,反式阿法骨化醇峰相對阿法骨化醇峰的相對保留時間約為0.94,阿法骨化醇峰與反式阿法骨化醇峰之間的分離度應符合要求,阿法骨化醇峰拖尾因子應小于1.5,理論板數按阿法骨化醇峰計算不低于2500。測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。