青霉素過敏的根源在于藥物品質不純，其中所含青霉烯酸、青霉噻唑等是主要的致敏原。應用進口的高品質青霉素是不作皮試的，這在西方的多數國家亦成慣例。鑒于國產藥物因不同工藝流程所含致敏物的種類與數量不同，使用不同種青霉素(如氨芐青霉素，新青霉素等)不宜一律應用青霉素G鹽替代皮試，用藥中途更換不同廠家或同一廠家的不同生產批號的藥物時亦應重新皮試，以策安全。皮試液宜用生理鹽水，而不可應用注射用水。因后者可使青霉素產生青霉烯酸，不僅局部刺激性強，還易與血漿蛋白結合形成青霉素噻唑蛋白，誘致過敏反應。據測定，青霉素的水溶液在37℃下放置24小時，青霉烯酸的含量較配制時增加200倍左右。其水劑在放置過程中pH值會逐漸降低，下降速度與溫度、藥物濃度、放置時間呈負相關。溶液pH下降易使青霉素產生聚合反應，生成大分子致敏性聚合物。用做皮試液，不僅能呈現假陽性反應，還容易引起過敏性休克。因此皮試液配制好后應置低溫保存，只限當日使用。