非洲菊組織培養快繁技術

非洲菊為多年生草本植物，傳統的繁殖方法為播種或分株繁殖。但非洲菊種子壽命短、發芽率低，而且播種繁殖變異率很高，難以得到性狀一致的種苗，因而不能用于規模生產；而分株繁殖則存在繁殖慢，易退化和傳播病害，也不適于現代的大規模生產，因而目前國外一般都采用組織培養的方法來生產種苗。非洲菊的組培研究在國內已有報道，但均局限于對個別或少數品種的不同外殖體、不定芽誘導率及生長方面的研究，即局限于實驗室階段的研究。在本項目中，為配合非洲菊種質資源庫的建立及在生產中迅速推廣非洲菊的優良品種，盡快提高我國非洲菊切花的品質，我們不僅對多達45個非洲菊品種進行了組培快繁，做了研究、比較。同時，也對組培快繁過程中某些因素對以后大田生產、切花品質及產量的影響進行了探索。現將結果報告如下：

材料與方法

1.材料：試驗材料為本所從國內外收集的所有非洲菊品種共計45個，取花梗長為1-3cm的花蕾，切取花托部位作為外殖體。

2.方法：將花梗在0.1％氯化汞溶液中消毒12分鐘后取出， 用無菌水沖洗7-8次。切下花托部位并分切為3-5mm小塊，放于誘導培養基上培養。置于光照1000lux，溫度25±3℃下培養。

待誘導出的不定芽長至3-4片葉，葉長約3-4cm大小時切下，置于增殖培養基上，于光照1500-2000lux，溫度25±3 ℃下進行增殖培養，周期為20-25天。

將叢芽切成單株芽苗，放于生根培養基上進行誘導生根，溫度、光照條件與增殖階段相同。經過一個月生根培養，將生根苗出瓶移栽到苗床并統計生根率。

試驗結果

一、非洲菊不定芽的誘導：

結果表明，各品種之間產生不定芽的能力差異很大， 對四種培養基的反應也不同。其中"皇后""紅粉佳人""胭脂""國王""金邊紅"在Ｃ培養基上不定芽誘導率最高；"紅太陽""黑珍珠""蛋黃""紅寶石""燦爛""紫薇"則在Ｂ培養基上誘導率最高；而"龍吐珠"則只在Ｄ培養基上才可誘導出不定芽。

二、非洲菊的增殖培養：

結果顯示，各個品種之間在增殖的速度上存在顯著差異。但在試驗范圍內，隨BA濃度的提高，增殖速度相應提高。但在較高的BA濃度條件下芽苗會變細、變弱，且隨BA濃度進一步提高，芽苗變得更加叢生、細弱。根據這種情況，生產中在努力提高芽苗增殖率的同時，還應保證分生芽苗的健壯。根據品種不同, 一般把增殖率控制在2.5 -5.0之間。

三、增殖培養中BA濃度對大田栽培的影響：

本項試驗中，采用增殖速度中等的"紅寶石"品種進行試驗。結果表明，在BA濃度為0.5ppm以下時，除增殖率隨BA 濃度增加而顯著提高外，其余各項指標均無顯著差異。而在BA濃度為1.0PPM及2.0PPM時，除增殖速度比BA濃度為0.25ppm時成倍增加外，試管苗還表現出細弱、矮化和脆化等現象，這些現象在BA2.0PPM時更加明顯。同時生根率及移栽成活率也隨BA濃度增加略有降低。這些在高濃度BA培養基上連續增殖15代以上的試管苗，移栽到大田后表現出旺盛的分孽力，葉短而多，同時切花產量明顯降低，且花莖細而矮，花朵明顯小于正常種苗。其中在BA2.0ppm的培養基中增殖的試管苗尤為突出。說明過高的BA濃度不僅會影響試管苗本身的質量，還會嚴重影響大田生產的切花的產量和品質。對生產中其它品種的觀察也可得出同樣結論。

四、增殖代數對繁殖速度及大田栽培的影響：

該項試驗所用品種仍為"紅寶石"。從所示結果可以看出，增殖速度隨著增殖代數的增加有明顯提高。增殖到第30代時繁殖速度分別比第20代和第10代時提高7％和20％。這種隨增殖代數增加而產生的培養材料對植物激素的依賴性減小的"馴化"現象在其它植物的組培中也有發現。試驗中，在增殖30代以內雖然增殖速度有較顯著提高，但對試管苗的質量，如試管苗的健壯與否、生根率及以后的大田生產中切花的質量和產量均無顯著影響。

五、生根及移栽結果：

非洲菊試管苗大部分品種均易誘導生根。經25-30 天的生根培養，所有試驗品種只有"鴻運"生根率低于70-80％，尚有待提高，其余品種的生根率均可達到90％以上，且平均每苗生根都在2.5 條以上。

將生根苗洗凈根部附著物，移入苗床。一周內保持遮光80％和適當的濕度。一周后，適當增加光照，且每周淋一次無機液肥。在這種條件下，一般成活率均可達到85％以上。

六、討論：

1.各品種間由花托誘導出不定芽的能力差異很大，品種間對激素種類和激素濃度的需求也有很大差異。因此為了獲得較高的不定芽誘導率，需要對激素的種類和水平作更廣泛的試驗。

2.由花托直接誘導出芽，同時將增殖培養基中激素水平和增殖速度控制在適當的水平，在增殖30代以內，非洲菊試管苗的總變異率均未超過2％。此外， 在保持相對低濃度的細胞分裂素水平的情況下，增殖30代以內的試管苗，移栽到大田后表現良好，沒有明顯的退化現象。表明該技術既可達到快速繁殖的目的，又可保證種苗的質量，可滿足現代化大規模生產的需要。但更高代數的試管苗的相應表現還有待進一步觀察。

3.組培快繁過程中植物激素特別是細胞分裂素濃度對以后大田生產的影響很大，當激素濃度過高時，會導致分孽太多，降低切花的產量和質量。因此，在組培快繁過程中，應避免細胞分裂素濃度過高。

4.通過對非洲菊組織培養技術的研究，不但將我所所有45個品種都建立了組培快繁體系, 隨時為社會提供大批量的優質種苗，創造一定的經濟效益；還可配合種質資源庫的建立及良種繁育，把引進及自育最新優良品種及時、快速地推廣到生產中去有利于迅速提高我國非洲菊切花品質。而組培快繁過程中的某些因素對以后大田生產的切花品質及產量的影響的研究結果，對完善非洲菊的試管苗生產技術，保證試管苗質量，促進非洲菊的規模化、產業化生產具有重要意義。