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  • 發布時間:2019-10-19 11:50 原文鏈接: 食品中淀粉的測定——酶水解法

    一、目的與要求:

    1、明確與掌握各類食品中淀粉含量的原理及測定方法。

    2、掌握用酶水解法和酸水解法測定淀粉的方法。

    二、原理

    樣品經除去脂肪及可溶性糖類后,其中淀粉用淀粉酶水解成雙糖,再用鹽酸將雙糖水解成單糖,最后按還原糖測定,并折算成淀粉。

    三,試劑:

    1、0.5%淀粉酶溶液:稱取淀粉酶0.5克,加100毫升水溶解,數滴甲苯或三氯甲烷,防止長霉,貯于冰箱中。

    2、碘溶液:稱取3.6克碘化鉀溶于20毫升水中,加入1.3克碘,溶解后加水稀釋至100毫升。

    3、乙醚

    4、85%乙醇

    5、6N鹽酸:量取50毫升鹽酸加水稀釋至100毫升。

    6、甲基紅指示液:0.1%乙醇溶液。

    7、20%氫氧化鈉溶液。

    8、堿性酒石酸銅甲液:稱取34.639克硫酸銅(CuS04·5H2O)。加適量水溶解,加0.5毫升硫酸,再加水稀釋至500毫升,用精制石棉過濾。

    9、堿性酒石酸銅乙液:稱取173克酒石酸鉀鈉與50克氫氧化鈉,加適量水溶解,并稀釋至500毫升,用精制石棉過濾,貯存于橡膠塞玻璃瓶內。  

    10、0.1000N高錳酸鉀標準溶液。

    11、硫酸鐵溶液:稱取50克硫酸鐵,加入200毫升水溶解后,人100毫升硫酸,冷后加水稀釋至1000毫升。   

    四、操作方法:   

    1、樣品處理:

    稱取2-5克樣品,置于放有折疊濾紙的漏斗內,先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪,再用約100毫升85%乙醇洗去可溶性糖類,將殘留物移入250毫升燒杯內,并用50毫升水洗濾紙及漏斗,洗液并入燒杯內,將燒杯置沸水浴上加熱15分鐘,使淀粉糊化,放冷至60℃以下,加20毫升淀粉酶溶液,在55-60℃保溫1小時,并時時攪拌。然后取1滴此液加1滴溶液,應不顯現藍色,若顯藍色,再加熱糊化并加20毫升淀粉酶溶液,繼續保溫,直至加碘不顯藍色為止。加熱至沸,冷后移入250毫升容量瓶中,并加水至刻度,混勻,過濾,棄去初濾液。取50毫升濾液,置于250毫升錐形瓶中,并加水至刻度,沸水浴中回流1小時,冷后加2滴甲基紅指示液,用20%氫氧化鈉溶液中和至中性,溶液轉入100毫升容量瓶中,洗滌錐形瓶,洗液并人100毫升容量瓶中,加水至刻度,混勻備用。

    B、測定:

    吸取50毫升處理后的樣品溶液,于400毫升燒杯內,加入25毫升堿性酒石酸銅甲液及25毫升乙液,于燒杯上蓋一表面皿,加熱,控制,在4分鐘內沸騰,再準確煮沸2分鐘,趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或c4垂融坩堝抽濾,并用60℃熱水洗滌燒杯及沉淀,至洗液不呈堿性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400毫升燒杯中,加25毫升硫酸鐵溶液及25毫升水,用玻棒攪拌使氧化亞銅完全溶解,以0.1000N高錳酸鉀標準溶液滴定至微紅色為終點。

    同時量取50毫升水及與樣品處理時相同量的淀粉酶溶液,按同一方法

    做試劑空白實驗。

    計算:X1=((A1-A2)×0.9)/( m1×50/250×V1/100×1000)×100

    X1:樣品中淀粉的含量,%;

    A1:測定用樣品中還原糖的含量,mg;

    A2:試劑空白中還原糖的含量,mg;

    0.9:還原糖(以葡萄糖計)換算成淀粉的換算系數;

    m1:稱取樣品質量,g;

    V1:測定用樣品處理液的體積,毫升(m1)。


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