Elisa生物檢測是一種敏感度高，同時特異性強，重復性好的實驗檢測方法，由于其試劑穩定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
目前市面上的Elisa試劑盒檢測原理主要有以下四種：直接法，間接法，夾心法，競爭法。
四種Elisa檢測方法由于其檢測原理各有優劣：
| 優點 | 缺點 | |
| 直接法 | 1.操作簡便 2.消除了二抗交叉反應 |
1.一抗由于添加標簽免疫活性降低 2.標記一抗耗時且昂貴 3.沒有產生信號放大 |
| 間接法 | 1. 一抗的最大免疫反應性得以保留 2. 高靈敏度，信號放大 |
1. 二級抗體可能發生交叉反應，產生非特異性信號 2. 需要額外的孵育步驟 |
| 夾心法 | 1.特異性，靈敏度高 2.適合復雜的樣本 |
1.檢測時間，反應時間增加 2.步驟繁瑣 |
| 競爭法 | 1. 通過觀察預期信號輸出中的干擾來測量樣本中抗原（或抗體）的濃度。 2. 最常用于分析物較小，不能同時跟兩種不同的抗體結合。 |
1.計算不太直觀 2.總體敏感性和特異性較低。 |
通常我們在購買我們所需要的Elisa試劑盒時主要會從以下幾個方面進行選擇：
Elisa試劑盒選擇原則：
| 指標 | 選項 |
| 樣本類型 | 人，小鼠，大鼠 |
| 檢測指標的類別 | ?多表位的大蛋白：夾心ELISA ?小分子：競爭ELISA |
| 檢測需求 | 定性或定量 |
| 靈敏度 | 低濃度的物質需選擇高靈敏度檢測方式 |
| 樣本體積 | 珍貴的樣本用少量的體積 |
| 回收率和線性 | ?靈敏度 ?動態范圍 ?標準曲線 |
| 檢測系統 | 比色法，熒光法，發光法 |
| 其他優勢 | 協議簡單，操作方便，實驗時間短 |
我們購買的Elisa試劑盒質量到底怎樣？檢測結果的可信度高不高？
Elisa試劑盒評價標準：
① 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，應大于等于0.9900。
② 靈敏度：反應試劑盒的最低檢測濃度
③ 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
④ 重復性：板內、板間變異系數
⑤ 回收率：判斷實驗的準確性和特異性
Elisa試劑盒的標準曲線：
標曲R值是幾個9才合格？
實驗室應按檢測標準（方法）的要求使用標準溶液或標準物質建立標準曲線。所用標準溶液或標準物質應覆蓋被測樣品的濃度范圍。檢測標準（方法）如無具體的要求，至少使用5個標樣（除空白外）建立線性標準曲線，每個點重復測定1-3次，對于篩選方法，線性回歸方程的相關系數不應低于0.98，對于確證方法，相關系數不應低于0.99。
其實，大于0.99是判斷是否為線性相關的一個標準，實際應用中線性大于0.999才是比較理想的。線性在0.99到0.999之間的監測結果只用接近最高濃度一半（中間濃度）的位置才比較準確，如果線性大于0.999的話，在整個線性范圍內都會有一個比較滿意的結果。
如果檢測的線性不好，可以減少標準的覆蓋范圍，將標準的濃度調整到待測樣品濃度附近，這樣結果也是非常準確的。例如，樣品的濃度約20ppb,但在0~50ppb范圍建立標準曲線，但線性非常不理想，這時可以將標準范圍調整到15~25ppb之間，作五個標準。