飼料中總磷量的測定

飼料中總磷量的測定

1 測定范圍

磷含量0—20ug/ml

2 測定原理

將試樣中有機物破壞，使磷游離出來，在酸性溶液中，釩鉬酸銨處理，生成黃色的(NH4)3·PO4 NH4VO3·16M O O3(磷－礬－鉬酸復合體)，在波長420nm下進行比色測定。3儀器及設備

粉碎機或研缽

分析篩：40目，孔徑0.45mm

分析天平，感量0.0001g

分光光度計，有10mm比色池，可在420nm下進行比色測定

高溫爐：可控爐溫度（550度左右）

坩堝：瓷質

容量瓶：50，100，1000ml

刻度移液管：1.0，2.0，3.0，5.0，10ml

凱氏燒瓶

電爐：1000W

4 試劑及配制

4.1 鹽酸（化學純）溶液：1：1水溶液（V：V）

4.2 濃硝酸化學純

4.3 釩鉬酸銨顯色試劑：稱取偏釩酸銨（分析純）1.25g，加硝酸250ml，另取鉬酸銨（分析純）25g，加蒸餾水400ml溶解，在冷卻條件下將此溶液倒入上溶液，且加蒸餾水調至1000ml，避光保存。如生成沉淀則不能使用。

4.4 磷標準溶液：將磷酸二氫鉀在105度干燥1小時，在干燥器中冷卻后稱0.2195g，溶解于蒸餾水中，定量轉入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用蒸餾水稀釋到刻度，搖勻，即成50ug/ml的磷酸標準溶液。

4.5試樣的選取和制備

取有代表性試樣用四分法縮減至200g，粉碎至40目，裝入密封容器中，防止試樣成分的變化或變質。

4.6測定步驟

4.6.1 試樣的分解

4.6.1.1 干法：稱取試樣2—5g于坩堝中（準確至0.0002g），在電爐上低溫炭化至無煙為止，再將其放放高溫爐于550度左右下灼燒3小時（或測灰分后繼續進行），取出冷卻在坩堝中加入1：1鹽酸溶液10ml和濃硝酸數滴，小心煮沸約10分鐘，將此溶液轉入100ml容量瓶

中，并用熱蒸餾水洗滌坩堝及漏斗中濾紙，冷卻至室溫后，定容，搖勻，為試樣分解液。

4.6.1.2 濕法：稱取試樣2—5g于凱氏燒瓶中（準確至0.0002g）加入硝酸（化學純）30ml，小心加熱煮沸，至二氧化氮黃煙逸盡，冷卻后加入70％—72％高氯酸（分析純）10ml，繼續加熱煮沸至溶液無色，不行蒸干（危險），冷卻后加蒸餾水50ml，并煮沸驅逐二氧化氮，冷卻后轉入100ml容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，搖勻，為試樣分解液。

4.6.1.3 標準曲線的繪制

準確移取磷標準溶液（50ug/ml）0，1.0，2.0，5.0，10.0，15.0ml于50ml容量瓶中，各加入釩鉬酸銨顯色制10ml，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘以上，以0ml溶液為參比，用10mm比色池，在420nm波長下，用分光光度計測定各溶液的吸光度。以磷含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線。

4.3.1.3 試樣的測定

準確移取試樣分解液1—10ml（含磷50－750ug）于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色試劑10ml，按（4.6.1.3）的方法顯色和比色測定，以空白為參比，測得試樣分解液的吸光度。用標準曲線查得試樣分解液的含磷量。

4.7 測定結果計算

4.7.1 計算公式

樣品中總磷質量分數按下式計算

W(p)=a*(V/V1)/m

式中：m為試樣質量；V為試樣分解液總體積；V1比色測定時所移取試樣分解液體積；a為由標準曲線查得試樣分解液含磷量。

所得結果應精確到兩位小數

4.7.2 重復性。每個試樣稱取兩個平行樣進行測定，以其算術平均值為結果。

含磷理在0.5％以下（含0.5％）以允許相對偏差3％；

含磷量在0.5％以下，允許相對偏差10％

4.8 注意事項

4.8.1 比色時，待測液磷含量不宜過濃，最好控制在1ml含磷0.5mg以下，

4.8.2 待測液在加入試液后應靜置10分鐘，再進行比色，但不能靜置過久。