1. 在含有細胞培養基的細胞培養管中無菌添加骨髓樣本1ml(參考細胞密度<1×106/ml)，蓋
緊培養瓶，充分混均；
2. 水平培養12, 24, 48h(37℃)；
3. 加入4-5滴秋水溶液，培養一定時間；
4. 離心3-4 min（2000 rpm）；
5. 去除上清液，保留0.5ml的細胞；
6. 重新充分混懸細胞1；
7. 加入5ml 低滲溶液(KCl 0.075M)，室溫低滲5-7min；
8. 重復4、5、6操作，用Ibraimov’s溶液混懸細胞；
9. 加入5 ml 調整過的Ibraimov’s 溶液1 2 (92ml H2O+5ml 冰乙酸+3ml 甲醇)，混均，室溫
處理3-4 min；
10.重復4、5、6操作，用甲醇溶液混懸細胞1；
11.立即離心，重復4、5操作，用固定液混均細胞；
12.加入5 ml固定液1，重新混均3；
13.離心(1200 rpm) 5 min，去除全部上清液；
14.加入0.5ml新鮮配置的固定液混懸細胞3；
推薦：a. 滴片前將此樣在室溫下保持30min；
b. 使用新鮮配置的固定液；
15.滴片(干凈的玻片)，在Maxchrome儀器中分散染色體4。
①使用混旋器，保證懸浮細胞的一致性。
②產生均勻的褐色和泡沫表明此步操作非常成功。
③如果樣品暫時不滴片，請在冰箱中保存。
④推薦以下操作，以達到最佳的染色體分散質量：
a) 如果看到中期細胞沒有染色體（“broken metaphases”），表明RH值過高；
b) 如果染色體沒有完全分散，細胞質背景較重，表明RH值偏低。