單克隆抗體(monoclonal antibody,MAb),是針對專一的抗原決定簇產生的抗體,單克隆技術又名雜交瘤技術起源于1975年,主要原理是利用產生抗體的B細胞與骨髓瘤細胞雜交融合成雜交瘤細胞,生產抗體。
目前大量制備單抗的方法主要有兩種方法:
一種是動物體內生產法(腹水制備),在小鼠腹腔內接種雜交瘤細胞,雜交瘤細胞在小鼠腹腔內增殖,并產生和分泌單克隆抗體,約1-2周,可見小鼠腹部膨大,用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體;另一種是細胞體外培養法,將雜交瘤細胞置于培養瓶中進行培養,在培養過程中,雜交瘤細胞產生并分泌單克隆抗體,收集培養上清液,離心去除細胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。

單克隆抗體的制備流程
腹水制備法操作簡單、制備成本低,是目前國內生產抗體的主要方式,但是,得到的腹水常混有小鼠的各種雜蛋白(包括Ig),而且還有污染動物病毒的危險。而體外培養法通過轉瓶培養制備的細胞培養級抗體,不但不含小鼠雜蛋白和動物病毒,而且抗體易純化,目前在國外抗體生產中非常流行。
由于腹水中單克隆抗體的產生通常會導致內源性宿主蛋白的污染,因此細胞培養對于小規模和大規模單克隆抗體的生產至關重要。 Abnova采用獨有的細胞培養法制備細胞培養級抗體,與腹水和經典細胞培養相比,該方法可為客戶提供高親和力、高純度且不受小鼠免疫球蛋白污染的抗體。