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  • 發布時間:2019-04-14 14:10 原文鏈接: 高密度脂蛋白膽固醇的檢測方法及標準化研究進展

    眾多流行病學研究證實,高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平與動脈粥樣硬化(AS)呈負相關。美國Framingham的研究顯示,HDL-C每減少0.026 mmol/L(1 mg/dl),冠心病(CHD)發生的風險將增加2%~3%。目前臨床上已廣泛采用HDL-C下降作為CHD危險因素指標。低HDL-C[?.91 mmol/L (35 mg/dl)]是CHD的主要危險因素,而高HDL-C[≥1.55 mmol/L(60 mg/dl)]被認為是負危險因子,具有保護性[1,2]。作者參考美國國家膽固醇教育計劃(NCEP)有關文件及新近文獻資料,對HDL-C檢測方法及標準化問題作一簡述。

      一、HDL的生物化學

     

     

      與乳糜微粒(CM)、極低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)相比,高密度脂蛋白(HDL)是密度最大的脂蛋白(d=1.063~1.210 kg/L)。其組分中蛋白質(Pro)、磷脂(PL)、膽固醇(chol)和甘油三酯(TG)各約占50%、25%、20%和5%。HDL中Pro主要是載脂蛋白(apo)AI和AII;chol占總膽固醇(TC)的25%~35%,酯化膽固醇(CE)和游離膽固醇(FC)之比約為3∶1。HDL可通過酶和受體的作用,將周圍組織的chol移至肝臟降解處理,同時抑制細胞結合和攝取LDL-C,阻止chol在動脈壁的沉積,故HDL被認為是AS的預防因子[3]。

      二、HDL-C檢測方法

     

     

      由于所有脂蛋白都含有chol,因此必須從其他脂蛋白中分離出HDL后再行測定。分離HDL的方法有超速離心法、凝膠過濾法、免疫化學法、電泳法及化學沉淀法。臨床化學實驗室應用最廣泛的是化學沉淀法。近來國外連續報道了幾種HDL-C的直接測定方法,因其簡便、快速,能進行自動化分析,已引起廣泛關注。

     

     

      1.參考方法:美國疾病控制與預防中心(CDC)測定HDL-C的參考方法為超速離心法,也為NCEP所推薦[4]。該法分三步進行:(1)超速離心(40000r/min,18.5小時)除去密度(d)<1.006 kg/L富含TG的脂蛋白(CM、VLDL)。(2)下層懸浮液用肝素-MnCl2法(Hep-Mn2+法)離心沉淀(1 500×g,30分鐘),以除去富含apoB的脂蛋白[LDL、Lp(a)]。(3)測定上清液中chol含量,方法用CDC參考方法(ALBK法)。此法主要用于靶值的確定及各種HDL-C檢測方法學評價,也是國際間人群調查研究準確性基礎。由于需超速離心機,操作復雜且嚴格,所需標本量大(5 ml血漿),離心時間長,一般實驗室難以開展,不適于大規模標本比較研究。CDC膽固醇參考方法實驗室網絡(Cholesterol reference Method LaboratoryNetwork, CRMLN)近來選用了一種“指定性比較方法”作為轉移CDC參考方法準確性的適用方法。此法首先用硫酸葡聚糖(DS50,分子量5萬)作沉淀劑(DS50-Mg2+),離心沉淀,除去含apoB的脂蛋白[CM、VLDL、IDL、LDL和Lp(a)];然后上清液HDL中膽固醇采用ALBK法測定。這種方法已在網絡的每個實驗室被仔細評價及成功地進行標準化,相對CDC參考方法而言,已大為簡化[5]。發展與CDC參考方法結果具有可比性的改良簡單化參考方法將會促進HDL-C標準化在常規實驗室中的開展。

     


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